培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
小鼠膈肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
膈肌組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭狀細(xì)胞
分類(lèi)
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1913
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常膈肌組織。
2）細(xì)胞鑒定：肌動(dòng)蛋白（α-actin）熒光染色為陽(yáng)性。
3）經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5）細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭狀細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
膈肌是位于胸腔與腹腔之間的肌肉纖維組織，其周?chē)鸀榧「?，中央為腱膜，是機(jī)體重要的呼吸肌。
組織學(xué)上，膈肌屬骨骼肌，成熟的骨骼肌纖維不具有增殖能力。骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞是骨骼肌與肌膜之間的一種體積較小的細(xì)胞，排列在肌纖維的表面，當(dāng)肌纖維損傷后，可分化為肌纖維修復(fù)損傷。隨著組織發(fā)育的成熟，肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量相對(duì)減少。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豚鼠白介素4(IL-4)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人SAA/LDL復(fù)合物 elisa分析檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞CASEIN KINASE 2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
小鼠趨化因子(CC基序)配體2(MRC2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠核因子κB受體激活因子(RANκ)elisa檢測(cè)試劑盒
組織基質(zhì)金屬（MMP-9）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
人副腫瘤性天皰瘡(PNP)抗體elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)elisa檢測(cè)試劑盒
魚(yú)脫氫表雄酮(DHEA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
嗅覺(jué)受體家族5亞基3抗體 OR5P3
血型Lewis A抗原抗體 Blood Group Lewis a
蛋白磷酸酶樣A結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 PTPLAD1
電導(dǎo)鈣激活鉀通道蛋白1抗體 KCNN1
F-box蛋白9抗體 FBXO9
FITC標(biāo)記人CD68單克隆抗體 human CD68/FITC
磷酸化組蛋白去乙?；?span>7抗體 phospho-HDAC7 (Ser358)
卵母細(xì)胞表達(dá)蛋白OOEP抗體 OOEP
21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框87抗體 C21orf87
5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體 C5ORF42
肌微管素相關(guān)蛋白9抗體 MTMR9
脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 ATXN1
P物質(zhì)受體抗體 Neurokinin 1 Receptor
RAS相關(guān)蛋白Rab5B單克隆抗體 RAB5B
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK7抗體 SRSF7
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α抗體 GTF2A1 alpha
大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉素相關(guān)蛋白1(FRAP1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠膈肌細(xì)胞Ub ELISA Kit
山羊谷胱甘肽還原酶(GSR)elisa分析檢測(cè)試劑盒
p18; SUMO 1 protein ligase; SUMO conjugating enzyme UBC9; SUMO-1 conjugating enzyme; SUMO-1-protein ligase; SUMO-conjugating enzyme UBC9; SUMO-protein ligase; UBC9; UBC9_HUMAN; UBCE9; Ube2i; Ubiquitin carrier protein 9; Ubiquitin carrier protein; Ubiquitin carrier protein I; Ubiquitin conjugating enzyme 9; Ubiquitin conjugating enzyme UbcE2A; Ubiquitin like protein SUMO 1 conjugating enzyme; Ubiquitin protein ligase E2I; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 I; Ubiquitin-protein ligase I.
小鼠膈肌細(xì)胞
大鼠腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞
BICR 10人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞
鼻咽癌細(xì)胞株；6-10b (STR)
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。