培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠甲狀腺成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
甲狀腺組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭形細(xì)胞
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1854
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常甲狀腺組織。
2)細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
甲狀腺是人體大的腺。棕紅色，分左右兩葉，中間相連，呈 H形。甲狀腺濾泡是甲狀腺的基本結(jié)構(gòu)單位。此外，甲狀腺中以及外圍還有部分結(jié)締組織，這些結(jié)締組織是由成纖維細(xì)胞組成，對(duì)濾泡起到保護(hù)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)elisa檢測(cè)試劑盒
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冰凍切片組織RyR受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
犬I 型膠原蛋白elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pcDNA-AM）
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植物胞質(zhì)蛋白提取試劑盒100T
乙?；M蛋白H2B (Lys23)鼠單克隆抗體 Histone H2B (Acetyl K23)
有機(jī)溶質(zhì)載體蛋白1抗體 OSCP1
二肽基肽酶6抗體 DPP6
防御素β-109/β-defensin 109抗體 DEFB109
GRRP1蛋白抗體 GRRP1
G蛋白偶聯(lián)受體25抗體 GPR25
囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體 CFTR
尼曼匹克C1前體蛋白抗體 NPC1
AF488標(biāo)記的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體 STAT5, Alexa Fluor 488 conjugated
AF680標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子OTX1抗體 OTX1, Alexa Fluor 680 conjugated
膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1抗體 GLIPR1L1
精氨酰tRNA合成酶抗體 Arginyl tRNA synthetase
SET易位蛋白/髓系白血病相關(guān)蛋白抗體 SET
Synaptophysin單克隆抗體 Synaptophysin
源盒蛋白HOXB1抗體 HOXB1
晚期角質(zhì)化包膜蛋白抗體 LCE6A
谷氨酰胺合成酶（GS)測(cè)試盒
小鼠甲狀腺成纖維細(xì)胞Rabbit IgG / APC
轉(zhuǎn)錄起始因子RAP30抗體
hPanK3; MGC16863; OTTHUMP00000160961; Pank3; PANK3_HUMAN; Pantothenate kinase 3; pantothenic acid kinase; Pantothenic acid kinase 3.
小鼠甲狀腺成纖維細(xì)胞
大鼠乳腺成纖維細(xì)胞
ChaGo-K-1 肺支氣管癌
大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞；RS1；RS1
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。