培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
結(jié)腸組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1809
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常結(jié)腸組織。
2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞角蛋白-18（CK-18）熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第 3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母M，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。結(jié)腸黏膜上皮在環(huán)境或遺傳等多種致癌因素作用下導(dǎo)致結(jié)腸癌，是常見的惡性腫瘤之一。因此，體外培養(yǎng)結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞為研究進(jìn)一步結(jié)腸癌等提供了前提和基礎(chǔ)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)elisa檢測(cè)試劑盒
牛表皮生長(zhǎng)因子(EGF)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
細(xì)胞單胺氧化酶A型（MAO－A）活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞IKKα激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
人果糖胺(FRA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠紅細(xì)胞**素受體(EPOR)elisa檢測(cè)試劑盒
植物葉綠體膜蛋白提取試劑盒100T
皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白抗體 ERPINA6/Cortisol Binding Globulin
鞘磷脂合成酶2抗體 Sphingomyelin Synthase 2
G蛋白偶聯(lián)受體112抗體 GPR112
G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子16抗體 RGS16
抑凋亡基因bag1抗體 Bag1
原鈣粘附蛋白1抗體 PCDH1
泛素載體蛋白L6抗體 Ube2L6
縫隙樣蛋白Slitl2抗體 SLITL2
尾型源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體 CDX2
細(xì)胞分裂周期樣激酶2抗體 CLK2
SPOPL蛋白抗體 SPOPL
TRIM26蛋白抗體 TRIM26
AF680標(biāo)記的胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 Nanog, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750標(biāo)記的血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 Angiotensin II type 1A receptor, Alexa Fluor 750 conjugated
緊密連接蛋白1抗體 CLDN1
跨膜絲氨酸蛋白酶11D抗體 TMPRSS11D
載玻片細(xì)胞ER BETA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
小鼠結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞Rabbit Anti-Rat IgG H&L / PE-Cy5
FAM19A3蛋白抗體
HDGF-2; Hdgfrp2; HDGR2_HUMAN; Hepatoma-derived growth factor 2; Hepatoma-derived growth factor; Hepatoma-derived growth factor-related protein 2; heptoma derived growth factor related protein 2; HRP-2.
小鼠結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞
大鼠前列腺成纖維細(xì)胞
CMK-86人急性巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞
大鼠血管平滑肌細(xì)胞；USMC
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。