培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
小鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
口腔黏膜組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣
分類(lèi)
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1982
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的口腔黏膜組織。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf 原代 上皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
口腔上皮細(xì)胞是一種上皮細(xì)胞。人的口腔上皮細(xì)胞是扁平、多邊形的，形狀不很規(guī)則。 口腔各壁都有黏膜覆蓋。口腔上皮細(xì)胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。
上皮的垂直切面上，細(xì)胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細(xì)胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細(xì)胞，部分子細(xì)胞向淺層移動(dòng)。基底層以上是數(shù)層多邊形細(xì)胞，再上為幾層梭形或扁平細(xì)胞。僅靠近表面幾層細(xì)胞為扁平狀，基底層細(xì)胞能不斷分裂增生，以補(bǔ)充表層衰老或損傷脫落的細(xì)胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的，有利于復(fù)層扁平上皮的營(yíng)養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鴨β干擾素(IFN-β/IFNB)elisa檢測(cè)試劑盒
A型鉀離子通道調(diào)節(jié)蛋白4抗體
KCNIP4
細(xì)胞分裂周期37樣蛋白1抗體
CDC37L1
細(xì)胞S6 KINASE激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠肌球蛋白(MYS)elisa檢測(cè)試劑盒
豬白介素1(IL-1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
結(jié)核分枝桿菌抗體
Mycobacterium tuberculosis Ag85B
乳腺腫瘤病毒受體源蛋白抗體
FAM89B
跨膜蛋白59抗體 Anti-TMEM59
Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關(guān)蛋白抗體 Anti-RASA1
神經(jīng)細(xì)胞分化因子1抗體 Anti-NeuroD1/NEUROD
臂板蛋白3F抗體 Anti-Sema3F/semaphorin 3F
2，4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體
2,4-D(24D1)
核轉(zhuǎn)錄因子NFXL1抗體
NFXL1
血清學(xué)定義結(jié)腸抗原1抗體 Anti-SDCG1
神經(jīng)元特異性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗體 Anti-NSE
維甲酸相關(guān)孤兒受體γ抗體 Anti-RORG/ROR gamma
跨膜蛋白4超家族成員3抗體 Anti-TM4SF3
大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞酵母β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
小鼠丙二酸單酰輔酶A(malonyl CoA) elisa檢測(cè)試劑盒
CAD18_HUMAN; Cadherin 14; Cadherin14; Cadherin 18; Cadherin18; Cadherin 18, type 2; Cadherin-14; Cadherin-18; CDH14; CDH14L; CDH18; CDH24; EY CADHERIN.
小鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞
大鼠脾基質(zhì)細(xì)胞
F-36P人白血病細(xì)胞
其它
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。