
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
卵巢組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1879
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常卵巢組織。
2) 細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 原代 內(nèi)膜 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
卵巢不僅是卵子產(chǎn)生、生長并成熟的器官,也是腦垂體前葉分泌的靶器官之一。卵巢分為內(nèi)、外側(cè)兩面,其中,內(nèi)側(cè)面朝向盆腔,多與回腸緊鄰。
探明卵巢內(nèi)膜細(xì)胞的增值及功能,在發(fā)情周期和妊娠期發(fā)生變化的機(jī)理及調(diào)控因素,對(duì)進(jìn)一步研究卵泡發(fā)育的調(diào)控、排卵、黃體形成和退化、卵巢等發(fā)病機(jī)理,以及在這些生理和病理過程中參與其中的及細(xì)胞因子作用機(jī)理均有重要意義。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠尿皮質(zhì)素3(UCN3)elisa檢測(cè)試劑盒
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組蛋白H3賴氨酸9甲基化1C抗體 KMT1C
12號(hào)染色體開放閱讀框30抗體 NAP1/C12orf30
黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白多糖重組兔單克隆抗體 NG2
環(huán)指蛋白15抗體 RNF15
PDZ和LIM結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白7抗體 PDLIM7
Percp-Cy5.5標(biāo)記小鼠CD3e單克隆抗體 Mouse CD3e/Percp-Cy5.5
神經(jīng)細(xì)胞**蛋白Nav1抗體 Neuron navigator 1
生長抑制蛋白3抗體 ING3
eIF2B1蛋白抗體 eIF2B1
FAM124A蛋白抗體 FAM124A
磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶3抗體 phospho-MST3 (Thr178)
磷酸化雄受體抗體 phospho-Androgen Receptor (Ser213)
初生多肽相關(guān)復(fù)合物亞單位α,肌肉特異型蛋白抗體 Naca
單絲氨酸蛋白激酶1+2抗體 LIM kinase 1 + 2
鋅指蛋白288抗體 ZNF288
星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體 PEA15
大鼠唾液酸酶2(SIAL2)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞Donkey Anti-Rabbit IgG H&L / PE-Cy5.5
鋅指蛋白375抗體
Protein tyrosine phosphatase PTPsigma; Protein tyrosine phosphatase receptor type S; Protein tyrosine phosphatase receptor type sigma; Ptprs; PTPRS_HUMAN; PTPSIGMA; R PTP sigma; R-PTP-S; R-PTP-sigma; Receptor-type tyrosine-protein phosphatase S; Receptor-type tyrosine-protein phosphatase sigma.
小鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞
大鼠胚胎成纖維細(xì)胞
GOTO人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
人NK細(xì)胞白血病細(xì)胞;YT
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。