
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開(kāi)腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好,可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
腦動(dòng)脈組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類(lèi)
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1944
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腦動(dòng)脈組織。
2)細(xì)胞鑒定:血管假性血友病因子(vWF)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf 原代 內(nèi)皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
腦動(dòng)脈為肌型動(dòng)脈,管壁薄,血管周?chē)鷽](méi)有支持組織。但腦動(dòng)脈血管內(nèi)膜厚,有發(fā)達(dá)的內(nèi)彈力膜。
血管新生是從原有血管系統(tǒng)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖、游走而形成新的子代血管分支的過(guò)程。腦動(dòng)脈新生可以重建有效血供,從而改善多發(fā)性、彌漫性腦動(dòng)脈粥樣硬化所致的腦缺血,終預(yù)防癡呆和腦梗死發(fā)生。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)elisa分析檢測(cè)試劑盒
干擾素調(diào)節(jié)因子5重組兔單克隆抗體
IRF5
自噬相關(guān)蛋白8A抗體
APG8A
磷脂酶D(Phospholipase D)總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
人膀胱腫瘤抗原(BTA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠雌二醇受體(ER)elisa檢測(cè)試劑盒
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前列腺相關(guān)蛋白MSMP抗體
MSMP
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框78抗體
c20orf78
宮頸癌原癌基因8抗體 Anti-TTC23
維甲酸相關(guān)孤兒受體β抗體 Anti-ROR beta
核受體相關(guān)因子-1抗體 Anti-Nurr1
細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體 Anti-SLC40A1
囊泡相關(guān)膜蛋白2重組兔單克隆抗體
VAMP2
DELE蛋白抗體
DELE
鈉-糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體 Anti-SGLT1/GLT 1
還原型輔酶Ⅱ/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸抗體 Anti-NADPH
核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體 Anti-RSK3/Ribosomal S6 kinase 3
味覺(jué)受體蛋白家族2亞基7抗體 Anti-TAS2R7/T2R7
大鼠富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Goat Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy3
血管非炎性蛋白2抗體
18 kDa pulmonary surfactant protein; 18 kDa pulmonary-surfactant protein; 6 kDa protein; Pulmonary surfactant apoprotein PSP B; Pulmonary surfactant associated protein B 18kD; Pulmonary surfactant associated protein B; Pulmonary surfactant associated proteolipid SPL Phe; SFTB3; SFTP3; SFTPB; SFTPB surfactant; Surfactant pulmonary associated protein B; Prosurfactant Protein B; pulmonary surfactant-associated glycoprotein B; proSP B; PSP B; PSPB; PSPB_MOUSE; Pulmonary surfactant-associated protein B; Pulmonary surfactant-associated proteolipid SPL(Phe); SFTB3; SFTP3; SFTPB; SP B; SPB.
小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞
HCC4006人肺腺癌細(xì)胞
人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞;NTERA-2
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。