競(jìng)爭(zhēng)法所測(cè)定的抗原只要有一個(gè)結(jié)合部位即可，因此，對(duì)小分子抗原如激su和藥wu之類的測(cè)定常用此法。該法的優(yōu)點(diǎn)是快，因?yàn)橹挥幸粋€(gè)保溫洗滌過(guò)程。但需用較多量的酶標(biāo)記抗原為其缺點(diǎn)。

一、  試驗(yàn)的重復(fù)性（精que度）

有二種方法來(lái)檢驗(yàn)試驗(yàn)的精que度：通常用變異系數(shù)來(lái)表示：1、幾個(gè)樣品用ELISA法同時(shí)進(jìn)行多次測(cè)定求出CV%；2、不同時(shí)間對(duì)不同操作者對(duì)某幾個(gè)樣進(jìn)行多次測(cè)定求出變異系數(shù)。CV是個(gè)體參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差與平均數(shù)的比率。

S / X ＝ CV ，CV應(yīng)低10%，不應(yīng)大于10～15%。

不論目測(cè)或分光光度計(jì)測(cè)定，均可作一個(gè)稀釋度或一系列稀釋度測(cè)定，一般常規(guī)診斷只用一個(gè)稀釋度判斷陽(yáng)性或陰性就可以了，這樣比較方便，現(xiàn)在推薦傳染病的血清診斷用1：200一個(gè)稀釋度。有些需要精que定量的，可作一系列稀釋度測(cè)定。

記錄結(jié)果有下列幾種方法：

1、“+”或“-”：所有超過(guò)規(guī)定的OD值（如OD，0.4）的標(biāo)本均屬陽(yáng)性，此規(guī)定OD值是根據(jù)事先測(cè)定大量陰性標(biāo)本所取得的，此規(guī)定值是陰性標(biāo)本的上限?；蛘咭砸唤M陰性標(biāo)本OD平均值加2～3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差作為陽(yáng)性閾值。

2、直接以O(shè)D值來(lái)表示，如0.4、0.7、1.2，OD值越大，陽(yáng)性反應(yīng)越強(qiáng)，但此數(shù)值是在固定實(shí)驗(yàn)條件下得到的結(jié)果，而且每次實(shí)驗(yàn)都要有參考標(biāo)本作對(duì)照。

3、以終點(diǎn)滴度表示：將標(biāo)本作連續(xù)稀釋，*高稀釋度能出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)者（即OD值仍大于陽(yáng)性閾值，即為該標(biāo)本的滴度。

4、以“比值表示：求出被檢標(biāo)本的OD值與一組陰性標(biāo)本OD值的比值，例如為陰性標(biāo)本的2倍或3倍，即為陽(yáng)性，比值小于2.1而大于1.5為可疑，<1.5為陰性。

測(cè)定標(biāo)本OD值-空白OD值

陰性對(duì)照OD值-空白OD值

如在此測(cè)定時(shí)以空白校正“O”點(diǎn)。

5、以“單位”來(lái)表示：在測(cè)定被檢標(biāo)本的同時(shí)，再測(cè)定一個(gè)含已知單位數(shù)的陽(yáng)性參考血清，用不同稀釋度作ELISA檢測(cè)后，以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，單位數(shù)為橫坐標(biāo)，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。以后可根據(jù)被檢標(biāo)本的OD值，從曲線上找出相應(yīng)的單位數(shù)，再乘于血清的稀釋倍數(shù)，即可得出被檢標(biāo)本的單位數(shù)。

作試驗(yàn)時(shí)的陰性參考血清*好不要顯色，否則會(huì)對(duì)結(jié)果判斷帶來(lái)困難，特別在目測(cè)時(shí)，當(dāng)陽(yáng)性標(biāo)本OD值>2.0時(shí)，應(yīng)作適當(dāng)稀釋后再作測(cè)定。

二、  對(duì)使用儀器要求

所用儀器如吸管、燒杯試管都要清潔，用于酶結(jié)合和底物的吸管和容器一定要分開(kāi)。試劑要求標(biāo)準(zhǔn)化。