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大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒操作步驟
日期:2024-10-22 21:25
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摘要:
大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒操作步驟:
1、包被:用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml,酶標板中每孔加入50μl,室溫、4℃或37℃過夜包被。
2、洗滌:棄包被液(用力拍干,再用無塵紙吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次(每孔均要加滿),每次3min~5min。
3、封閉:每孔加封閉液(1%BSA)250μl,37℃封閉2h。
4、洗滌:用1×PBST洗滌液洗板3次,每次3min~5min。
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大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒操作步驟:
1、包被:用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml,酶標板中每孔加入50μl,室溫、4℃或37℃過夜包被。
2、洗滌:棄包被液(用力拍干,再用無塵紙吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次(每孔均要加滿),每次3min~5min。
3、封閉:每孔加封閉液(1%BSA)250μl,37℃封閉2h。
4、洗滌:用1×PBST洗滌液洗板3次,每次3min~5min。
5、結合一抗:用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢血清,每孔100μl,要設立陰性對照,37℃孵育1.5h。
6、洗滌:同上。
7、結合酶標二抗:每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀釋倍數(shù)根據(jù)產品不同有所不同,可按說明書進行)50μl,37℃孵育1h。
8、洗滌:同上。
9、顯色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室溫避光顯色10min。
10、待顯色后,每孔加入50μl終止液(2mol/L H2SO4)終止反應。使用酶標儀讀取450nm的OD值,以確定血清抗體水平。