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WB抗原抗體反應(yīng)流程
日期:2024-10-22 23:04
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摘要:
WB抗原抗體反應(yīng)流程:
a. 0.1% TBST潤(rùn)洗封閉后的NC膜3次,每次5 min;
b. 稀釋一抗:稀釋液通常為脫脂牛奶或0.1% TBST,比例通常為1:1000(稀釋比例參見(jiàn)抗體說(shuō)明書(shū));
c. 孵育一抗:4 ℃下?lián)u床,過(guò)夜封閉;
d. 回收一抗,-20℃保存供重復(fù)使用,0.1% TBST潤(rùn)洗NC膜3次,每次5 min;
e. 孵育二抗:0.1% TBST稀釋HRP標(biāo)記的對(duì)應(yīng)種屬的二抗,比例為1:5000-1:10000,室溫下?lián)u床孵育60 min;
f. 0.1% TBST潤(rùn)洗NC膜3次,每次10 min;
tips:抗體孵育條件、時(shí)間等詳見(jiàn)《【W(wǎng)estern-Blotting】WB核心...
WB抗原抗體反應(yīng)流程:
a. 0.1% TBST潤(rùn)洗封閉后的NC膜3次,每次5 min;
b. 稀釋一抗:稀釋液通常為脫脂牛奶或0.1% TBST,比例通常為1:1000(稀釋比例參見(jiàn)抗體說(shuō)明書(shū));
c. 孵育一抗:4 ℃下?lián)u床,過(guò)夜封閉;
d. 回收一抗,-20℃保存供重復(fù)使用,0.1% TBST潤(rùn)洗NC膜3次,每次5 min;
e. 孵育二抗:0.1% TBST稀釋HRP標(biāo)記的對(duì)應(yīng)種屬的二抗,比例為1:5000-1:10000,室溫下?lián)u床孵育60 min;
f. 0.1% TBST潤(rùn)洗NC膜3次,每次10 min;
tips:抗體孵育條件、時(shí)間等詳見(jiàn)《【W(wǎng)estern-Blotting】WB核心理論:抗原抗體特異性反應(yīng)》;