氧化節(jié)桿菌操作步驟：

1. 事先將恒溫水浴的溫度調(diào)到42℃。

2. 從-70℃ 超低溫冰柜中取出一管(100 μl)感受態(tài)菌，立即用手指加溫融化后插入冰上，冰浴5~10 min。

3. 加入5 μl 連接好的質(zhì)?；旌弦?DNA含量不超過(guò)100 ng)，輕輕震蕩后放置冰上20 min。

4. 輕輕搖勻后插入42℃水浴中1~2 min進(jìn)行熱休克，然后迅速放回冰中，靜置3~5 min。

5. 在超凈工作臺(tái)中向上述各管中分別加入500 μl LB培養(yǎng)基(不含抗jun素)輕輕混勻，然后固定到搖床的彈簧架上37℃震蕩1 h。

6. 在超凈工作臺(tái)中取上述轉(zhuǎn)化混合液100-300 μl，分別滴到含合適抗jun素的固體LB平板培養(yǎng)皿中，用酒精燈燒過(guò)的玻璃涂布棒涂布均勻。

7. 如果載體和宿主菌適合藍(lán)白斑篩選的話，滴完菌液后再在平板上滴加40 μl 2% X-gal，8 μl 20% IPTG，用酒精燈燒過(guò)的玻璃涂布棒涂布均勻。

8. 在涂好的培養(yǎng)皿上做上標(biāo)記，先放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中30~60 min 直到表面的液體都滲透到培養(yǎng)基里后，再倒置過(guò)來(lái)放入37℃恒溫培養(yǎng)箱過(guò)夜。

9. 在被xi菌污染的桌面上噴灑70%乙醇，擦干桌面，寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

10. 觀察平板上長(zhǎng)出的菌落克隆，以菌落之間能互相分開(kāi)為好。注意白色菌斑。