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PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少原因與解決方案參考

日期:2024-10-23 01:42
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摘要: PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少原因與解決方案參考: 1、退火溫度不合適。以 2 ℃ 為梯度設(shè)計梯度 PCR 反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。 2、DNA 模板量太少。增加 DNA 模板量。 3、PCR 循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。 4、引物量不足。增加體系中引物含量。 5、延伸時間太短。以 1 kb/分鐘的原則設(shè)置延伸時間。 6、變性時間過長。變性時間過長會導(dǎo)致 DNA 聚合酶失活。 7、DNA 模板中存在抑制劑。確保 DNA 模板...

PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少原因與解決方案參考:

  1. 1、退火溫度不合適。以 2 ℃ 為梯度設(shè)計梯度 PCR 反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。

  2. 2、DNA 模板量太少。增加 DNA 模板量。

  3. 3、PCR 循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。

  4. 4、引物量不足。增加體系中引物含量。

  5. 5、延伸時間太短。以 1 kb/分鐘的原則設(shè)置延伸時間。

  6. 6、變性時間過長。變性時間過長會導(dǎo)致 DNA 聚合酶失活。

  7. 7、DNA 模板中存在抑制劑。確保 DNA 模板干凈。

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