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PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少原因與解決方案參考
日期:2024-10-23 01:42
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摘要:
PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少原因與解決方案參考:
1、退火溫度不合適。以 2 ℃ 為梯度設(shè)計梯度 PCR 反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。
2、DNA 模板量太少。增加 DNA 模板量。
3、PCR 循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。
4、引物量不足。增加體系中引物含量。
5、延伸時間太短。以 1 kb/分鐘的原則設(shè)置延伸時間。
6、變性時間過長。變性時間過長會導(dǎo)致 DNA 聚合酶失活。
7、DNA 模板中存在抑制劑。確保 DNA 模板...
PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少原因與解決方案參考:
-
1、退火溫度不合適。以 2 ℃ 為梯度設(shè)計梯度 PCR 反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。
-
2、DNA 模板量太少。增加 DNA 模板量。
-
3、PCR 循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。
-
4、引物量不足。增加體系中引物含量。
-
5、延伸時間太短。以 1 kb/分鐘的原則設(shè)置延伸時間。
-
6、變性時間過長。變性時間過長會導(dǎo)致 DNA 聚合酶失活。
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7、DNA 模板中存在抑制劑。確保 DNA 模板干凈。