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ELISA實驗血清與血漿預(yù)處理
日期:2024-10-23 01:46
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摘要:
血清是ELISA實驗zui 常用的樣本,其預(yù)處理也十分簡單。使用無熱原無內(nèi)毒su 的試管或離心管采集血液樣本,將試管或離心管在室溫下放置2小時或4℃過夜,分離出血清(建議傾斜試管或離心管以擴(kuò)大液面的橫截面,使血清可以更大程度地分離出來)。2-8℃下以1000×g離心20分鐘,小心收集上清液(血清),立即進(jìn)行測定。建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,避免反復(fù)凍融。
在收集血液樣本的過程中應(yīng)避免溶血,因為紅細(xì)胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質(zhì),這種情況下,ELISA實驗中將會出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng),導(dǎo)致...
血清是ELISA實驗zui 常用的樣本,其預(yù)處理也十分簡單。使用無熱原無內(nèi)毒su 的試管或離心管采集血液樣本,將試管或離心管在室溫下放置2小時或4℃過夜,分離出血清(建議傾斜試管或離心管以擴(kuò)大液面的橫截面,使血清可以更大程度地分離出來)。2-8℃下以1000×g離心20分鐘,小心收集上清液(血清),立即進(jìn)行測定。建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,避免反復(fù)凍融。
在收集血液樣本的過程中應(yīng)避免溶血,因為紅細(xì)胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質(zhì),這種情況下,ELISA實驗中將會出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng),導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。另外,樣本還應(yīng)避免xi 菌污染,因為xi 菌可能含有內(nèi)源性HRP,也會導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。
血漿使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本,采集后30分鐘內(nèi),2-8℃下以1000×g離心15分鐘,小心收集上清液(血漿)。建議在-20℃或-80℃下將收集的血漿分裝保存,避免反復(fù)凍融。樣本應(yīng)避免溶血或高血脂。常見的抗凝劑包括EDTA鈉鹽,肝素鈉,枸櫞酸鈉等。檢測前請仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書,查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。