免 疫熒光(immunofluorescence，IF)，通常是指用熒光標(biāo)記的抗體示蹤或檢查樣品中相應(yīng)抗原的方法。根據(jù)抗原抗體反應(yīng)，將不影響抗原抗體相互作用的熒光分子標(biāo)記在抗體上，與其相應(yīng)的抗原反應(yīng)后，在熒光顯微鏡下針對(duì)熒光標(biāo)記分子的激發(fā)光發(fā)射光進(jìn)行觀察，從而檢測(cè)目的指標(biāo)的相對(duì)含量、在組織細(xì)胞中的定位。

樣本準(zhǔn)備要求：

1、取材手法：要求取材器械鋒利，盡可能選擇薄的手術(shù)刀片，減少剪刀的使用，避免擠壓挫傷標(biāo)本。較準(zhǔn)確地取到目的部位組織，夾取標(biāo)本的時(shí)候盡量遠(yuǎn)離目的區(qū)域組織。

2、取材速度：盡量保證樣本離體后5min內(nèi)放入到合適的固定液內(nèi)。如果一只動(dòng)物同時(shí)取多種器官，優(yōu)先取消化器官，其次取中 樞神經(jīng)系統(tǒng)器官(腦，脊髓等)，皮膚、肌肉等可放到后取。

3、組織塊大?。何唇?jīng)灌注的標(biāo)本組織厚度不要超過1cm。

4、固定液：針對(duì)不同的標(biāo)本特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊欢ㄒx用正確的固定液。

5、固定液量：固定液體積為組織的10倍，且組織能在容器內(nèi)自由移動(dòng)，不貼壁不沉底，并做好清晰標(biāo)記。

6、固定溫度：常溫即可，無需冷藏，切勿冷凍結(jié)冰，否則固定液結(jié)冰形成冰晶嚴(yán)重破壞組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。