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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:流感嗜血桿菌PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:FS-P63608
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
流感嗜血桿菌PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
詳情介紹:

產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:流感嗜血桿菌PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P63608
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。

實(shí)驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
實(shí)驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

轉(zhuǎn)基因玉米NK603品系基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

桑色素(標(biāo)準(zhǔn)品) Morin 480-16-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

β-萘氧乙酸鈉(植物級) BNOA-Na, β--Naphthoxyacetic acid sodium salt 10042-71-4 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物級

豬去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Hyodeoxycholic acid 83-49-8 質(zhì)量規(guī)格:含量測定

30%ACRYLAMIDE-BIS(19:1)溶液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:500毫升

喹硫平二聚體雜質(zhì) Quetiapine Dimer Impurity 945668-94-0 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

2,2'-二羥基-4-甲氧基二苯甲酮(>98.0%(GC)) 2,2'-Dihydroxy-4-methoxybenzophenone 131-53-3 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

肉桂醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Cinnamyl alcohol 104-54-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

10%TWEEN 80溶液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升

朝藿定B(標(biāo)準(zhǔn)品) Epimedin B 110623-73-9 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

聚乙二醇2000 PEG 2000 25322-68-3 質(zhì)量規(guī)格:M.W:2000

DL-焦谷氨酸 DL-Pyroglutamic acid 149-87-1 質(zhì)量規(guī)格:0.98

L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽 H-Phe-OEt.HCl 3182-93-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

DL-丙氨酰-DL-丙氨酸 DL-Ala-DL-Ala 2867-20-1 質(zhì)量規(guī)格:0.97

大車前苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Plantamajoside 104777-68-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

 冰凍切片組織組蛋白NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

流感嗜血桿菌PCR檢測試劑盒LB肉湯 英文名稱:LB Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于分子生物學(xué)中大腸桿的培養(yǎng)用途用于細(xì)增培養(yǎng)。成分(g/L)蛋白胨 10.0g酵母粉 5.0g氯鈉 10.0gPH值 7.0±0.1用 法稱取本品2.5克,溶解于100ml蒸餾水中, 121℃高壓滅15分鐘備用。

LB營養(yǎng)瓊脂 英文名稱:LB Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于分子生物學(xué)中大腸桿的培養(yǎng)用途用于發(fā)酵工程、基因工程和分子生物學(xué)中大腸桿的培養(yǎng)。成分(g/L)胰蛋白胨 10.0g酵母浸粉 5.0g氯鈉 10.0g瓊脂 15.0gPH值 7.0±0.2用 法稱取本品4克,溶解于100ml蒸餾水中, 121℃高壓滅15分鐘,備用。質(zhì)量控制和典型特征接種10-100個大腸桿JM109、HB101在36±1℃培養(yǎng)18-24小時,生長明顯。

苯丙氨酸脫氨酶 英文名稱:Phenylalanine Deaminase Medium 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*20 產(chǎn)品用途:用于苯丙氨酸脫氨酶試驗產(chǎn)品用途:用于苯丙氨酸脫氨酶試驗。

伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB) 英文名稱:Eosin-Methylene Blue Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:弱選擇性培養(yǎng)基、用于分離腸道致病,特別是大腸桿(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))用途弱選擇性培養(yǎng)基,用于分離腸道致病,特別是大腸桿。成分(g/L)蛋白胨 10.0g乳糖 10.0g磷酸氫二鉀 2.0g瓊脂 15.0g伊紅 0.4g美藍(lán) 0.065gPH值 7.1±0.2※請放置陰涼干燥處保存用 法稱取本品 3.74克,加熱溶解100ml蒸餾水中,121℃高壓滅15分鐘,備用。質(zhì)量控制和典型特征:在36±1℃培養(yǎng)24±2h,典型大腸桿落特征為具黑色中心有金屬光澤或無光澤。

Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 英文名稱:Kovacs's indole Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2 產(chǎn)品用途:用于吲哚(靛基質(zhì))試驗Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒說明試劑盒組成:溶液A(對二甲氨甲醛5.0g,戊醇75.0ml,濃鹽酸25.0ml):5ml*2操作步驟1、純培養(yǎng)物接種于1ml色氨酸肉湯或胰蛋白水培養(yǎng)基中或其他適宜的培養(yǎng)基中,36±1℃培養(yǎng)24±2h。2、加入溶液A 2-4滴,混勻。3、立即觀察結(jié)果,也可以放置室溫5-10min觀察結(jié)果。結(jié)果判斷陽性反應(yīng):在培養(yǎng)基上部有一紅色環(huán)。陰性反應(yīng):黃色、桔黃色或棕色。

甲基紅指示劑盒 英文名稱:Methyl Red Indicator Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2 產(chǎn)品用途:用于甲基紅試驗[使用方法]:將MR-VP生化管培養(yǎng)48小時,滴加5滴甲基紅溶液。[結(jié)果判斷]:陽性反應(yīng):紅色;陰性反應(yīng):黃色。[保存]:2-8℃保存;有效期一年。

哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 英文名稱:Columbia- MUG Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于大腸桿的熒光檢測(SN標(biāo)準(zhǔn))用途:用于大腸桿的熒光檢測。成分(g/L)特殊蛋白胨 23.0可溶性淀粉 1.0氯鈉 5.0瓊脂 15.0pH值7.3 ± 0.2 25℃用法稱取本品 4.4g 和 0.01g MUG ,加熱溶解于 100ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,冷至55-60℃左右時,傾入無平皿,備用。

BDS培養(yǎng)基 英文名稱:BDS Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于培養(yǎng)擬桿用途:用于擬桿的分離培養(yǎng)。用法稱取本品 43.7g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,115℃高壓滅 20 分鐘,冷至 50℃左右時,加入無新霉素0.5g,混勻,傾入無平皿。

葡萄糖瓊脂 英文名稱:Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于細(xì)的綜合生化試驗(不含溴紫)產(chǎn)品用法:稱取本品 38.52g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。產(chǎn)品用途:用于細(xì)的綜合生化試驗。貯存條件:請放置陰涼干燥處保存。

Andrade氏糖類肉湯 英文名稱:Andrade’s Carbohydrate Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于細(xì)的糖發(fā)酵試驗用途:用于細(xì)的糖發(fā)酵試驗。成分(g/L)蛋白胨 10.0牛肉浸粉 3.0氯鈉 10.0酸性品紅 0.1pH值7.6 ± 0.2 25℃用法稱取本品 23.1g ,另稱取糖類或醇類(葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇按 10g 稱取;其他糖類或醇類按 5g 稱取),加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝試管,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。注:若培養(yǎng)基顏色偏紅,可滴加幾滴 1N NaOH 溶液脫色后再高壓滅。

 


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