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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:甲型肝炎病毒PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:FS-P63664
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
甲型肝炎病毒PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
詳情介紹:

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:甲型肝炎病毒PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P63664
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。

產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

動物新生心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次

固黑K鹽 Fast Black K Salt 27766-47-8 質(zhì)量規(guī)格:>80%,BR

潑尼松龍 Prednisolone 50-24-8 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP/BP

緩激肽 Bradykinin 1490132 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

細(xì)胞磷脂皮爾斯(Pearse)染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

商陸皂苷甲(標(biāo)準(zhǔn)品) Esculentoside A 65497-07-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大蒜素,二烯丙基二硫 Allicin 539-86-6 質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀

3-吲哚乙酸(IAA) 3-Indoleacetic acid 87-51-4 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

β-NADP;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸;氧化型輔酶 II β-NADP 24292-60-2 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

大鼠ERβ基因甲基化檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

植物果膠甲酯酶(pectin methylesterase;PME)活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

鹽酸伐昔洛韋水合物 Valacyclovir hydrochloride hydrate 124832-27-5 (anhydrous) 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

正辛酰胺(>98.0%(GC)(N)) n-Octanamide 629-01-6 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N)

N-反式-對香豆酰酪胺(標(biāo)準(zhǔn)品) N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine 36417-86-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

植物組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

蜜二糖 Melibiose 585-99-9 質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物

甲型肝炎病毒PCR檢測試劑盒賴氨酸培養(yǎng)基(LYS) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于野生釀酒酵母的分離稱取本品66g,8.4ml60%乳溶液,加熱煮沸,溶解于1000ml蒸餾水中,冷至50℃左右時,用16%乳酸溶液調(diào)整PH至4.8±0.2,混勻,傾入無平皿,備用。

馬鈴薯葡萄糖瓊脂(USP)平板 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:9cm*10 產(chǎn)品用途:用于霉,酵母計數(shù)(GB/SN標(biāo)準(zhǔn))用于霉,酵母計數(shù)

馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 英文名稱:Potato Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于霉,酵母計數(shù)用途用于霉,酵母計數(shù)。成分(g/L)馬鈴薯粉 6.0g葡萄糖 20.0g瓊脂 20.0gPH值 5.4-5.8用 法稱取本品 46.0克,加入1000ml蒸餾水中,115℃高壓滅20分鐘備用.注意事項若所檢樣品細(xì)含量較低,則培養(yǎng)基無需添加氯霉素;若所檢樣品細(xì)含量較高,則傾注平板前每升培養(yǎng)基中需添加過濾除的氯霉素100mg。

馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Potato Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于霉的鑒定培養(yǎng)用途:用于霉的鑒定培養(yǎng)。成分(g/L)馬鈴薯浸粉 6.0瓊脂 20.0pH值5.4 - 5.8 25℃用法稱取本品 26.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

馬鈴薯葡萄糖水 英文名稱:Potato Dextrose Water 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于椰毒假單胞酵米面亞種和真的增培養(yǎng)用途:用于椰毒假單胞酵米面亞種和真的增培養(yǎng)。成分(g/L)馬鈴薯浸出粉 6.0葡萄糖 20.0用法稱取本品 26.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15分鐘,備用。

綜合馬鈴薯培養(yǎng)基 英文名稱:Intergrated Potato Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于真的分離培養(yǎng)用途:用于真的分離培養(yǎng)。成分(g/L)馬鈴薯浸粉 10.0葡萄糖 20.0七水硫酸鎂 1.5磷酸二氫鉀 3.0硫胺素 0.008瓊脂 15.0pH值6.0±0.2 25℃用法稱取本品48.8g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

麥芽汁培養(yǎng)基 英文名稱:Malt Extract Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于霉和酵母增培養(yǎng)用途:用于霉和酵母增培養(yǎng)。成分(g/L)麥芽浸粉 13 0.0氯霉素 0.1pH值5.6 ± 0.2 25℃用法:稱取本品 130.1g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶或試管,121℃高壓滅15 分鐘,備用。注:高壓滅后有沉淀物。

YPD液體培養(yǎng)基 英文名稱:YPD Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于酵母的增培養(yǎng)用途:用于酵母的增培養(yǎng)。成分(g/L)蛋白胨 20.0葡萄糖 20.0酵母浸粉 10.0pH 6.5±0.2用法稱取本品 50.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

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