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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:B族鏈球菌PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:FS-P63746
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
B族鏈球菌PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
詳情介紹:

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:B族鏈球菌PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P63746
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。

產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

磺胺甲二唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfamethizole 144-82-1 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品

鹽酸依匹斯汀 Epinastine HCl 80012-44-8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

多烯紫杉醇無水/多西他賽 Docetaxel anhydrous 114977-28-5 質(zhì)量規(guī)格:purity>99.0%,BR

咖啡糖精(saccharin)含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

純化線粒體II型L-3羥酰基-CoA 脫氫酶/β淀粉樣蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

石蠟切片組織鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

東莨菪內(nèi)酯 Scopoletin 92-61-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Tricyclazol solution 41814-78-2 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%

鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,,基體:1%HNO3) Lead standard 7439-92-1 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,,基體:1%HNO3

1-氮雜-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)(T)) 1-Aza-18-crown 6-Ether 33941-15-0 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)

DNA產(chǎn)物去鐵純化試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

酵母SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖+棉籽糖) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升

次野鳶尾黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Irisflorentin 41743-73-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

鹽酸丁螺環(huán)酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Buspirone Hydrochloride 33386-08-2 質(zhì)量規(guī)格:含量測定

銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3) Copper solution 7758-98-7 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3

L-谷氨酰胺 L-Glutamine 56-85-9 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

B族鏈球菌PCR檢測試劑盒ATCC培養(yǎng)基:2693改良Dixon(mDixon) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于真培養(yǎng)用于真培養(yǎng)稱取本品66.0g,另取10ml吐溫40,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅15min,備用

胰胨瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于魚類細(xì)病中病原的分離培養(yǎng)用于魚類細(xì)病中病原的分離培養(yǎng)稱取本品16.7g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅15min,備用

氧化亞鐵硫桿培養(yǎng)基 英文名稱:Thiobacillus Ferrooxidans Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于氧化亞鐵硫桿的培養(yǎng)用途:用于氧化亞鐵硫桿的培養(yǎng)。成分(g/L)硫酸銨 3.0氯鉀 0.1磷酸氫二鉀 0.5硝 0.01硫酸鎂 0.5硫酸亞鐵 44.2pH值2.0 25℃用法稱取本品 48.31g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,115℃高壓滅 20 分鐘,備用

可溶性淀粉瓊脂 英文名稱:Soluble Starch Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于微生物的淀粉水解試驗用途:用于微生物的淀粉水解試驗成分(g/L)可溶性淀粉 10.0磷酸氫二鉀 1.0硫酸鎂 1.0氯鈉 1.0硫酸銨 2.0碳 2.0硫酸亞鐵 0.001氯錳 0.001硫酸鋅 0.001瓊脂 20.0pH值7.2 ± 0.2 25℃用法稱取本品 37g,加入溶解于1000ml蒸餾水中 , 121℃高壓滅15 分鐘,備用

淀粉水解培養(yǎng)基 英文名稱:The Hydrolysis of Starch Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于細(xì)淀粉酶試驗,若用于白喉桿和鏈球分型鑒定,需補加羊血清5%用途用于細(xì)淀粉酶試驗,若用于白喉桿和鏈球分型鑒定,需補加羊血清5%。成分(g/L)蛋白胨 10.0g牛肉浸粉 3.0g氯鈉 5.0g可溶性淀粉 30.0g瓊脂 15.0gPH值 7.6用 法稱取本品 63 克,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,115℃高壓滅20分鐘,冷至50℃左右時,傾入無平皿,備用。

硅酸鹽細(xì)培養(yǎng)基 英文名稱:Silicate Bacteria Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于利用硅酸鹽的微生物的分離培養(yǎng)用途用于利用硅酸鹽的微生物的分離培養(yǎng)。成分(g/L)蛋白胨 10.0g酵母浸粉 2.0g胰酪蛋白胨 10.0g氯鈉 5.0g葡萄糖 1.0g氫鈉 0.1g瓊脂 15.0gPH值 7.0±0.2用 法稱取本品23.6克,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,116℃高壓滅30分鐘,備用。

GVC增液 英文名稱:GVC Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于椰毒假單胞酵米面亞種的選擇性增培養(yǎng)用途:用于椰毒假單胞酵米面亞種的選擇性增培養(yǎng)。成分(g/L)馬鈴薯浸出粉 6.0葡萄糖 20.0龍膽紫 0.0001氯霉素 0.02用法稱取本品 26.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝, 121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

BSSA培養(yǎng)基 英文名稱:BSSA Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于果汁中嗜酸耐熱的檢測用途:用于果汁中嗜酸耐熱的檢測。成分(g/L)酵母浸粉 2.0葡萄糖 1.0可溶性淀粉 2.0氯鈣 0.25硫酸鎂 0.5硫酸銨 0.2磷酸二氫鉀 3.0硫酸鋅 0.00018硫酸銅 0.00016硫酸錳 0.00015氯鈷 0.00015 0.0001鉬酸鈉 0.0003pH值3.7-4.0 25℃用法稱取本品 8.95g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。注:若加入瓊脂時,瓊脂與培養(yǎng)基分開滅之后,再混合在一起。

胰蛋白胨酵母膏葡萄糖肉湯 英文名稱:Tryptone-Yeast Extract-Glucose Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:稱取本品 20.3g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用成分(g/L)Trypticase Peptone/胰化酪蛋白 10.0Yeast Extract/酵母膏 1.0NaCl 8.0CaCl2?2H2O 0.3Glucose/葡萄糖 1.0pH值 7.2±0.1 25℃用法稱取本品 20.3g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

Casman瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Casman Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于嗜血屬的分離培養(yǎng)用途:用于嗜血屬的分離培養(yǎng)。用法稱取本品 42.6g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,冷卻至50℃時,加入 5% 脫纖維羊血和 0.15% 羊血球溶解液(洗凈的羊血球一份加滅蒸餾水 2 份制成),混勻,制成血瓊脂斜面或平板。

 

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