操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
服務(wù):所有的檢測試劑盒均免費代測,您只需要將您準備好的樣本郵寄到我司即可!本地也可以上門收取樣本!全程檢測試劑盒實驗技術(shù)指導(dǎo),免費代做實驗。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 |
精氨酸試劑盒 |
貨號 |
96T/48T |
貨號 |
FS-021454 |
產(chǎn)品名稱:精氨酸試劑盒
貨號:FS-021454
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn),已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準
Integrin a7(integrin alpha 7)整合素α7抗原 0.5mg
MLN(Motilin)peptide胃動素多肽 0.5mg
PAX9(Paired box gene 9)配對盒基因9抗原 0.5mg
Skp2 peptide細胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原 0.5mg
TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4)生精細胞凋亡相關(guān)基因4抗原 0.5mg
c-phycocyanin(C-PC)C-藻藍素(藻藍蛋白) 0.5mg
MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1)基質(zhì)金屬蛋白酶-1(小鼠抗原) 0.5mg
Tyrosinase酪氨酸酶(多肽抗原) 0.5mg
DHT/KLH protein雙氫睪酮偶聯(lián)血藍蛋白 1mg
MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG)髓鞘少樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白(活性多肽) 1mg
Chicken IgG/FITC熒光素標記雞IgG 0.3ml
Rb Anti-FITC/PE熒光素PE標記兔抗FITC 0.1ml
精氨酸試劑盒通用試劑 2,3-吡啶二羧酸酐 2,3-Pyridinedicarboxylic anhydride,97% 699-98-9 5G
通用試劑 5-溴靛紅酸酐 5-Bromoisatoic anhydride,97% 4692-98-2 1G
通用試劑 氯二氟乙酸酐 Chlorodifluoroacetic anhydride,98% 2834-23-3 5G
通用試劑 2-甲基琥珀酸酐 Methylsuccinic anhydride,98% 4100-80-5 5G
通用試劑 甲基丙烯酸酐 Methacrylic anhydride,93% 760-93-0 25ML
通用試劑 順-5-降冰片烯-外型... cis-5-Norbornene-endo-2,3-dicarboxylic... 2746-19-2 1G
通用試劑 2,2-二甲基琥珀酸酐 2,2-Dimethylsuccinic anhydride,98% 17347-61-4 1G
通用試劑 1,4,5,8-萘四甲酸酐 NTCDA,96% 81-30-1 5G
通用試劑 氯化偏苯三酸酐 Trimellitic anhydride chloride,98% 1204-28-0 25G
通用試劑 1,1-環(huán)己基二乙酸酐 1,1-Cyclohexanediacetic anhydride,98% 1010-26-0 10G
通用試劑 順式六氫苯酐 cis-1,2-Cyclohexanedicarboxylic anhydr... 13149-00-3 100G
通用試劑 檸康酐 Citraconic anhydride,98% 616-02-4 25G