操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
服務(wù):所有的檢測(cè)試劑盒均免費(fèi)代測(cè),您只需要將您準(zhǔn)備好的樣本郵寄到我司即可!本地也可以上門(mén)收取樣本!全程檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。老客戶(hù)可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) |
甲啡肽試劑盒 |
貨號(hào) |
96T/48T |
貨號(hào) |
FS-021500 |
產(chǎn)品名稱(chēng):甲啡肽試劑盒
貨號(hào):FS-021500
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測(cè)目的:用于檢測(cè)血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測(cè)種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、等動(dòng)植物。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100μL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100μL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào),只要客戶(hù)提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿(mǎn)足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)
gp130(Human glucoprotein 130) ELISA KIT人糖蛋白130 96T
ER(Human Estrogen Receptor) ELISA Kit人雌受體 96T
i-PTH(Human intact Parathormone) ELISA Kit人全段甲狀旁素 96T
PWM(Human pokeweed mitogen) ELISA Kit人美洲商陸素 96T
Cr(Human Crosslaps) ELISA Kit人骨膠原交聯(lián) 96T
MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T
LAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit人亮氨酰氨基肽酶 96T
HK(Human Hexokinase) ELISA Kit人己糖激酶 96T
ACA(Human adrenal cortex antibody) ELISA Kit人腎上皮質(zhì)抗體 96T
Serpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G 96T
MTX(Human methotrexate) ELISA Kit人甲胺喋呤 96T
HBF(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit人胎兒血紅蛋白 96T
甲啡肽試劑盒通用試劑 4-羥基-7-甲氧基喹啉 4-Hydroxy-7-methoxyquinoline,97% 607-67-0 1G
通用試劑 6-硝基吲哚啉 6-Nitroindoline,97% 19727-83-4 1G
通用試劑 偶氮二羰基二嗎啉 Azodicarboxylic dimorpholide,≥98.0% 10465-82-4 5G
通用試劑 5-羥基喹啉 5-Hydroxyquinoline,99% 578-67-6 250MG
通用試劑 5-溴喹啉 5-Bromoquinoline,97% 4964-71-0 1G
通用試劑 2-苯基喹啉 2-Phenylquinoline,99% 612-96-4 1G
通用試劑 10-羥基苯并[ h] 喹啉 10-Hydroxybenzo[h]quinoline,98% 33155-90-7 1G
通用試劑 4,7-二甲基-1,10-菲... 4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline,98.0% 492472 250MG
通用試劑 4-羥基-8-甲基-2-三... 4-Hydroxy-8-methyl-2-(trifluoromethyl)... 1701-19-5 1G
通用試劑 5-硝基-1,10-菲咯啉 5-Nitro-1,10-phenanthroline,≥97% 4199-88-6 1G
通用試劑 6-乙氧基-2-甲基喹啉 2-Methyl-6-ethoxyquinoline,98.0% 6628-28-0 5G
通用試劑 2,3-二苯基喹喔啉 2,3-Diphenylquinoxaline,98% 1684-14-6 5G