綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
產(chǎn)品名稱(chēng):指狀游動(dòng)放線菌
拉丁文: Actinoplanes│digitatis
提供形式: 凍干物
**等級(jí): 1
模式菌株: yes
應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 CM0027
生長(zhǎng)條件 28C
存儲(chǔ)條件 -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,組成成分,重復(fù)性強(qiáng),而且微生物在這類(lèi)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)**。這類(lèi)培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營(yíng)養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類(lèi),或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類(lèi)培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。
培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類(lèi)、甘油、二甲亞砜等。
人 β-防御素3 HBD-3 β-Defensins 3 12.5 400 pg/mL 1
人 β干擾素 IFN-β Interferon β 0.25 8 ng/mL 0.1
人 β痕跡蛋白 BTP β-trace protein 3 96 mg/L 0.1
人 β-聯(lián)蛋白 β-Catenin β-Catenin 20 640 pg/mL 1
人 β-內(nèi)啡肽 β-EP Beta-Endorphin 1.25 40 pg/mL 0.1
人 β內(nèi)酰胺酶 β-lactamase β-lactamase 3.75 120 U/L 0.1
人 β葡萄糖醛酸苷酶 βGD β-glucuronidase 0.75 24 U/L 0.1
人 β羥丁酸 β-HB β-hydroxybutyrate 15 480 μmol/L 1
人 β-微管蛋白 TUBB β-tubulin 3.75 120 pg/mL 0.1
人 β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1 BACE1 β-site APP-Cleaving Enzyme 1 0.25 8 ng/mL 0.1
人 β血小板球蛋白;β血栓環(huán)蛋白 β-TG β-Thromboglobulin 2 64 ng/mL 0.1
人 β血小板球蛋白;β血栓環(huán)蛋白 β-TG;NAP2 β-Thromboglobulin 2 64 ng/mL 0.1
人 γ氨基丁酸 GABA Gamma-aminobutyric acid 0.25 8 μmol/L 0.1
人 γ干擾素 IFN-γ Interferon γ 25 800 pg/mL 1
人 γ干擾素誘導(dǎo)單核因子 MIG;CXCL9 monokine induced by interferon-gamma 75 2400 pg/mL 10
人 γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16 IFI16;p16 interferon-inducible protein 16 5 160 pg/mL 1
人 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 γ-GCS γ-GCS 2.5 80 μmol/L 0.1
人 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶 γ-GT γ-glutamyl transpeptidase 2.5 80 IU/L 0.1
CD48 / SLAMF2 / BCM1 抗體, 兔多抗 ELISA 400 μg
CXADR 抗體, 兔單抗 ELISA 50 μg
CD48 / SLAMF2 / BCM1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IP 50 μg
ASAM / CLMP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 μg
ASAM / CLMP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 μg
teroglobin / SCGB1A1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 μg
DSC2 抗體, 兔單抗 ELISA 50 μg
DSC2 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 μg
DSC2 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 μg
DSC2 抗體, 兔單抗 ELISA 50 μg
VEGFR3 / FLT-4 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 μg
DSC2 抗體, 兔多抗 ELISA 400 μg
指狀游動(dòng)放線菌 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA IHC-P 50 μg
CXADR / CAR 抗體, 兔多抗 ELISA 400 μg
CXADR / CAR 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM 25 Test
CXADR / CAR 抗體, 兔單抗 FCM IF ICC/IF 50 μg
CXADR / CAR 抗體 (PE), 兔單抗 FCM 25 Test
CXADR 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 μg