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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:視網(wǎng)膜色素上皮細胞

  • 產(chǎn)品型號:FS-X019908
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
視網(wǎng)膜色素上皮細胞 在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
詳情介紹:

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產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

視網(wǎng)膜色素上皮細胞

5×105

FS-X019908

 

產(chǎn)品名稱:視網(wǎng)膜色素上皮細胞

產(chǎn)品規(guī)格:5×105

貨號:BH-X019908

產(chǎn)品類型:原代細胞

單位:T25/瓶

提供細胞鑒定:提供**熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度(℃):37

運輸溫度(℃):常溫

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

主要功能:

(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。

(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。

(3)與血管的進展和穩(wěn)定有關(guān)。

 生理變化:

(1)主動脈硬化。

(2)主動脈瘤

(3)主動脈鈣化。

基本特性:

(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。

(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色。

(3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。

(4)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。

(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色驗證。

(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。



培養(yǎng)步驟:

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

 

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

營養(yǎng)肉湯(NB)    250(g)

產(chǎn)芽孢肉湯    250(g)

膽汁七葉苷瓊脂(BEA)    100(g)

Preston肉湯基礎(chǔ)    250(g)

MKTTn肉湯基礎(chǔ)    250(g)

氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ)    250(g)

乳糖膽鹽培養(yǎng)基    1000(g)

視網(wǎng)膜色素上皮細胞 抑制素βE(INHβE)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforInhibinBetaE(INHbE)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

癌胚抗原相關(guān)粘附分子8(CEACAM8)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforCarcinoembryonicAntigenRelatedCellAdhesionMolecule8(CEACAM8)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

甘油磷酸二酯磷酸二酯酶1(GDE1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforGlycerophosphodiesterPhosphodiesterase1(GDE1)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

多巴胺受體D4(DRD4)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforDopamineReceptorD4(DRD4)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

白介素6(IL6)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforInterleukin6(IL6)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforInsulinLikeGrowthFactorBindingProtein3(IGFBP3)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

Klothoβ蛋白(KLβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforKlothoBeta(KLb)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

延伸蛋白A2(ELOA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforElonginA2(ELOA2)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

周期素依賴性激酶5(CDK5)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforCyclinDependentKinase5(CDK5)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

CD6分子(CD6)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforClusterOfDifferentiation6(CD6)  規(guī)格:48T/96T  進口、國產(chǎn)

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細胞能盡快通過*易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。


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