細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	A-431人表皮鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞	英文名稱	BCL2AAAJurkat：BCL2 (AAA Jurkat
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB6119	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來源	皮膚	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱；A431; A431/P；人表皮癌細(xì)胞

種屬來源；人

年齡性別；女性，85歲

組織來源；皮膚

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；皮膚癌細(xì)胞株A-431源自一位85歲女性，是D.J.Giard等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。它在抗胸腺細(xì)胞球蛋白、血清處理的NIH 瑞士小鼠中形成類似于惡性黑素瘤的快速增長(zhǎng)的皮下腫瘤，在普通成纖維細(xì)胞和瓊脂上形成克隆。這是一個(gè)超三倍體人細(xì)胞株。

STR位點(diǎn)；Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：9，13；D16S539：12，14；D18S51：13，17；D19S433：15，15.2；D21S11：28；D2S1338：17，20；D3S1358：14，20；D5S818：12，13；D7S820：10；D8S1179：13；FGA：20；TH01：9；TPOX：11；vWA：15，17；

生物等級(jí)；1

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)；無

保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; CRL-1555 ATCC; CRL-7907BCRC; 60161 BCRJ; 0032 DSMZ; ACC-91 ECACC; 85090402

培養(yǎng)基；90%DMEM+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

倍增時(shí)間；~80-100小時(shí)

致瘤性；Yes, forms rapidly growing subcutaneous tumors in immunosuppressed mice and colonies in soft agar.

染色體；72~79

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

IMPG2蛋白抗體    IMPG2

1號(hào)染色體開放閱讀框38抗體    C1orf38

RHO 蛋白共沉淀分析試劑盒    馬環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa檢測(cè)試劑盒

HRP酶穩(wěn)定劑20g    小鼠肌酸激酶工酶MB(CK-MB)elisa檢測(cè)試劑盒

早老素蛋白-2抗體    presenilin 2

干擾素誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白3抗體   IFIT3

泛素激活酶2B抗體  Anti-Ube2B    PAP-α/β/γ/多聚合酶α/β/γ抗體  Anti-PAPOLA/B/G

凋亡誘導(dǎo)受體PLEKHG5抗體  Anti-PLEKHG5    可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2B1抗體  Anti-SLCO2B1/OATPB

Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgM    Goat Anti-Human IgM / Cy5.5

巖藻糖1磷酸鳥苷酰轉(zhuǎn)移酶抗體    FPGT

犬I 型膠原蛋白elisa分析檢測(cè)試劑盒    RCB I ELISA Kit

小鼠核轉(zhuǎn)錄因子kBP65(NFkBP65)elisa分析檢測(cè)試劑盒    NFkBP65ELISAKit

猴谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶A1(GSTA1)elisa分析檢測(cè)試劑盒    GSTA1 ELISA kit

A-431人表皮鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa分析檢測(cè)試劑盒    DPPⅣELISAKit

磷脂酰肌醇-5-磷酸鹽-4激酶2型α抗體    PIP4K2A

熱休克蛋白70樣蛋白抗體    HSPA1L

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。