細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	A-673人尤文氏肉瘤細(xì)胞	英文名稱	CORL279：COR-L279
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB7271	培養(yǎng)條件	DMEM+ 10% Foetal Bovine Serum37 ℃, 5% CO2
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	多邊形
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
組織來(lái)源	肌肉	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

種屬來(lái)源: 人

性別年齡： 15 歲，女性

組織來(lái)源: 肌肉

生長(zhǎng)特性： 貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài): 多邊形

細(xì)胞規(guī)格: 1 X 10 6cells/T25 或 1 mL 凍存管

培養(yǎng)條件: DMEM+ 10% Foetal Bovine Serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件: 90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3 傳代, 2-3 天傳 1 代

起始識(shí)別復(fù)合蛋白亞基1抗體    ORC1L/ORC1

四磷酸鳥(niǎo)苷水解酶抗體    HDDC3

CD90抗體  Anti-Thy-1/CD90/ Thy1.1    丙酮酸脫氫酶激酶4抗體  Anti-PDK4

環(huán)指蛋白131抗體  Anti-PJA2/RNF131    細(xì)胞周期G2/M期快速誘導(dǎo)蛋白SPDYA抗體  Anti-SPDYA

G蛋白β樣蛋白抗體    GNB1L

嗅覺(jué)受體5T2抗體   OR5T2

鋅指蛋白923抗體  Anti-ZBTB40/ZNF923    軸突生長(zhǎng)誘向因子4抗體  Anti-Netrin 4

核糖體蛋白S3抗體  Anti-RPS3    轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM2抗體  Anti-SIM2

大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa分析檢測(cè)試劑盒    Rat P-Selectin ELISA kit

人骨形成蛋白6(BMP-6)elisa分析檢測(cè)試劑盒    HumanBMP-6ELISAKit

細(xì)胞/組織氨丙基三乙氧基硅烷載玻片制備試劑盒    人20S蛋白酶體(20SP)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)elisa檢測(cè)試劑盒    小鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)elisa檢測(cè)試劑盒

LRWD1蛋白抗體    LRWD1

A-673人尤文氏肉瘤細(xì)胞細(xì)胞色素P450 2F1抗體    CYP2F1

FAM70A蛋白抗體 FAM70A    FITC標(biāo)記人CD11c單克隆抗體 human CD11c/FITC

磷酸化周期素依賴激酶2抗體 Phospho-CDK1 (Thr14)    菱形結(jié)合域源蛋白RHBDF1抗體 RHBDF1

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。