細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	ACHN人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞	英文名稱	ACHN:ACHN
產(chǎn)品貨號	A01X654	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	腎細(xì)胞腺癌，胸水轉(zhuǎn)移灶	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 人干擾su可抑制ACHN細(xì)胞生長；ACHN細(xì)胞能用于人干擾su、干擾su誘導(dǎo)因子的抗腫瘤活性研究。

年齡（性別） 男；22歲

組織來源 腎細(xì)胞腺癌，胸水轉(zhuǎn)移灶

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 腎癌細(xì)胞

生物等級 1

倍增時(shí)間 ~28-36 hours

致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1611 ECACC; 88100508

磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 phospho-ROCK2 (Tyr256)    磷酸化二氫嘧啶酶樣2(CRMP2/DPYL2)抗體 Phospho-CRMP2 (Thr509)

B細(xì)胞轉(zhuǎn)錄激活因子抗體 BATF    CD81重組兔單克隆抗體 TAPA1/CD81

線粒體二羧酸載體蛋白11抗體 SLC25A11    腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體 Adenylosuccinate Lyase

癌基因ETS2抗體 ETS2    白細(xì)胞共抗原CD45抗體 CD45

軟骨基質(zhì)相關(guān)蛋白UCMA抗體 UCMA    神經(jīng)激肽U抗體 Neuromedin U

MCART2蛋白抗體 MCART2   NAD(P)H 苯醌脫氫酶 2抗體 NQO2

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體 CD82    轉(zhuǎn)導(dǎo)素β1X連鎖蛋白抗體 TBL1X/SMAP55

谷氨酸受體紅藻氨酸離子2/谷氨酸受體6抗體 GRIK2    核仁磷酸蛋白3抗體 Nucleoplasmin 3

α酮戊二酸脫氫酶（α-KGDH）測試盒    小鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）elisa檢測試劑盒

線粒體呼吸鏈復(fù)合物 Ⅲ 活性測試盒 20管/10樣 生化法    寡核苷酸探針非位素化學(xué)發(fā)光法DNA斑點(diǎn)雜交完全試劑盒

小鼠鐵蛋白（Ferritin）elisa檢測試劑盒    大鼠角蛋白18(KRT18)elisa檢測試劑盒

細(xì)胞磷酸二酯酶4（PDE4）活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒    人神經(jīng)激肽A（OPG）elisa檢測試劑盒

犬脂肪酸結(jié)合蛋白elisa檢測試劑盒    細(xì)胞脊髓過氧化酶（MPO）活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒

ACHN人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa檢測試劑盒    大鼠雌酮(E1)elisa分析檢測試劑盒

角蛋白相關(guān)蛋白20.4抗體    KAP20.4

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白127抗體    CCDC127

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。