
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
CFSC-8B:CFSC8B
產(chǎn)品貨號
A01X1126
培養(yǎng)條件
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
產(chǎn)品種屬
大鼠
凍存條件
詳見說明
組織來源
大鼠肝臟
用途
僅供科研研究實驗
商品詳情:
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞于原代末期凍存。
細(xì)胞特性
1)來源:大鼠肝臟
2)形態(tài):貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、、酵母和檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

公司正在出售的產(chǎn)品:

源盒基因HOXA3蛋白抗體 HOXA3
ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運因子1抗體 Anti-Tap1/ABCB2 三磷酸腺苷門控陽離子通道蛋白抗體 Anti-P2RX4
磷酸二酯酶4A8抗體 PDE4A8
Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgG H&L Rabbit Anti-Horse IgG H&L / Cy3
細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體 Anti-ZDHHC16 NADH脫氫酶黃素蛋白1抗體 Anti-NDUFV1
MAWD結(jié)合蛋白抗體 Anti-PBLD 神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體 Anti-Septin 2/Sept2/NEDD5
磷酸化胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體 phospho-CENTB1 (Ser554)
核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 Anti-RelB 分選連接蛋白11抗體 Anti-SNX11人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa分析檢測試劑盒 HumanIP-10ELISAKit
人補體片段3c(C3c)elisa分析檢測試劑盒 C3cELISAKit
大鼠5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa分析檢測試劑盒 5-HIAA ELISA Kit
蛋白示蹤上樣緩沖液非還原,5× 5ml PARP蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
小鼠CD33分子(CD33)elisa檢測試劑盒 桌面DNA溶液
MCTP1蛋白抗體 MCTP1
CFSC-8B大鼠肝星形細(xì)胞胎盤和前列腺相關(guān)蛋白DLG5抗體 DLG5
魚類白介素1α(IL-1α)elisa分析檢測試劑盒 IL-1α ELISA kit
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時,進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細(xì)胞凍存。