細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	DH-82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞	英文名稱	DH-82:DH82
產(chǎn)品貨號	A01X1174	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	巨噬細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	狗	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	：惡性組織細(xì)胞增生癥	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱：DH-82; DH 82

種屬來源：狗

年齡性別：雄；10歲

組織來源：：惡性組織細(xì)胞增生癥

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：巨噬細(xì)胞樣

背景簡介：DH82細(xì)胞具有類似巨噬細(xì)胞形態(tài)：，并能吞噬乳膠顆粒。DH82細(xì)胞具有Fc γ受體陽性，F(xiàn)c μ和C3b受體陰性；DH82細(xì)胞不**IL-1。

生物等級：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-10389 BCRC; 60110 BCRJ; 0077 ECACC; 94062922

培養(yǎng)基：MEM（ATCC改良）＋15% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

人白介素32(IL-32)elisa分析檢測試劑盒       IL-32ELISAKit

體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6（AMMC）活性       小鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa檢測試劑盒

睪酮(T)elisa分析檢測試劑盒       T ELISA Kit

NUP54抗體       NUP54

三葉肽因子2抗體  Anti-TFF2       尿激酶型纖溶酶原激活因子抗體  Anti-PLAU/UPA/Urokinase

大鼠透明質(zhì)酸酶1(HYAL1)elisa檢測試劑盒       體液銅離子濃度比色法定量檢測試劑盒

9號染色體開放閱讀框78抗體      C9orf78

親環(huán)素相關(guān)蛋白1抗體  Anti-PPIL1       DNA聚合酶δ相互作用蛋白3抗體  Anti-SKAR溶質(zhì)載體家族24成員4抗體       SLC24A4

人丙二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)elisa分析檢測試劑盒       HumanmalonylcoenzymeAELISAKit

APC標(biāo)記的小鼠抗牛IgG H&L       Mouse Anti-Bovine IgG H&L / APC

人CC趨化因子受體5(CCR5)elisa分析檢測試劑盒       HumanCCR5ELISAKit

小鼠球蛋白A(IgA)elisa分析檢測試劑盒       IgAELISAKit

大鼠Smad7 elisa分析檢測試劑盒       Smad7 ELISA Kit

DH-82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞人胱天蛋白酶-5(CASP5)elisa分析檢測試劑盒       HumanCASP5ELISAKit

魚白三烯B4(LTB4)elisa分析檢測試劑盒       LT-B4 ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。