細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	H9c2(2-1)（大鼠心肌細(xì)胞）	英文名稱	H9c
產(chǎn)品貨號	AXB9819	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	成肌細(xì)胞
產(chǎn)品種屬	大鼠	凍存條件	詳見說明
組織來源	心臟，心肌層	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱；H9c2 (2-1); H9c2; H9C2；大鼠心肌細(xì)胞系

種屬來源；大鼠

年齡性別；胚胎

組織來源；心臟，心肌層

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；成肌細(xì)胞

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；H9c2(2-1)細(xì)胞是一株由Kimes·B和Brandt·B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細(xì)胞株亞克隆得到的細(xì)胞株；H9c2(2-1)細(xì)胞表現(xiàn)出許多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)細(xì)胞中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%，H9c2(2-1)細(xì)胞融合發(fā)生得很快。

生物等級；1

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; CRL-1446 BCRC; 60096 BCRJ; 0098 ECACC; 88092904

培養(yǎng)基；90%DMEM+10%FBS+P/S

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

膽堿磷酸酯酶2抗體 Phospholipase D2       蛋白酶活化受體4抗體 PAR4

FAM161A蛋白抗體 FAM161A       FBXO22蛋白抗體 FBXO22

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1單克隆抗體 STAT1       血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 Angiotensin II type 1A receptor

1號染色體開放閱讀框181抗體 C1orf181       2號染色體開放閱讀框18抗體 C2orf18

PE標(biāo)記小鼠CD38單克隆抗體 mouse CD38/PE       Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys64) antibody

磷酸化抑癌蛋白EZH2抗體 phospho-EZH2 (Thr487)       磷酸酯酶-2Ac抗體 PPP4C

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體 Cofilin      雞馬立克氏病火雞皰疹病毒(HVT)抗體 Marek's disease turkey herpesvirus

雙特異性磷酸酶抗體16抗體 DUSP16       碳酸酐酶6抗體 CA6雞谷胱甘肽過氧化物酶8(GPX-8)elisa分析檢測試劑盒       土壤鋰（lithium）酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒

細(xì)胞質(zhì)脆性X智力低下蛋白結(jié)合蛋白2抗體       CYFIP2

大鼠Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)elisa檢測試劑盒       小鼠干擾素α(IFNα)elisa檢測試劑盒

小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)elisa檢測試劑盒       大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1)elisa檢測試劑盒

小量微藻菌基因組DNA氯化銫萃取試劑盒（高多糖/酚）       兔CD8分子(CD8)elisa檢測試劑盒

人解脲脲原體抗體(UU-Ab)elisa分析檢測試劑盒       無脊椎動(dòng)物和昆蟲細(xì)胞基質(zhì)金屬（MMP）總活性比色法定量檢測試劑盒

H9c2(2-1)（大鼠心肌細(xì)胞）小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa檢測試劑盒       大鼠孤腓肽(OFQ/N)elisa檢測試劑盒

LRIT3蛋白抗體       LRIT3

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。