細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟：
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?：
?生物柜的使用?：確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過(guò)紫外，防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?：提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境，保持恒定的溫度（通常為37℃）?。
?培養(yǎng)基和血清?：特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如糖、氨基酸和維生素，添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程?：
?細(xì)胞接收與記錄?：記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息，包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀(guān)察?：定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為，確保細(xì)胞狀態(tài)健康，無(wú)污染?。
?細(xì)胞傳代?：當(dāng)細(xì)胞密度超過(guò)80%時(shí)進(jìn)行傳代，注意消化時(shí)間和條件，避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?：
?細(xì)胞系鑒定?：通過(guò)STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征，防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?：定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存，確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性：
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產(chǎn)品貨號(hào) |
AXB9851 |
凍存條件 |
無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存 ；90%FBS+10%DMSO |
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產(chǎn)品分類(lèi) |
牛細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
牛 |
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生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
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英文名稱(chēng) |
MDBKNBL |
組織來(lái)源 |
腎；正常細(xì)胞 |
商品介紹：
細(xì)胞別稱(chēng)；MDBK (NBL-1); NBL-1;
Madin-Darby Bovine Kidney; Madin Darby Bovine Kidney
種屬來(lái)源；牛
年齡性別；雄；成年
組織來(lái)源；腎；正常細(xì)胞
生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)；10代以?xún)?nèi)
背景簡(jiǎn)介；MDBK(NBL-1)細(xì)胞是由S·H·Madin和N·B·Darby在1957年2月18日從一只表觀(guān)正常的成年牛腎臟建立的。1973年，這株MDBK(NBL-1)細(xì)胞被牛病毒性痢毒(BVDV)感染；1982年，發(fā)現(xiàn)了一株未被BVDV感染的MDBK(NBL-1)細(xì)胞株，此細(xì)胞初來(lái)自ATCC1967年7月第96代的凍存管。MDBK(NBL-1)細(xì)胞的后代經(jīng)NVSL檢測(cè)，未發(fā)現(xiàn)被任何病毒污染的證據(jù)。1982年8月，R·A·Van Deusen將MDBK(NBL-1)提供給ATCC時(shí)，已傳代至第110代；MDBK(NBL-1)細(xì)胞未被BVDV感染。
生物等級(jí)；2
細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè)；無(wú)
基因表達(dá)情況；keratin
保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; CCL-22 ATCC;
CRL-6071DSMZ; ACC-174 ECACC; 90050801
培養(yǎng)基；RPMI-1640+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
；90%FBS+10%DMSO
?公司正在出售的產(chǎn)品：
protein 4.2 CD84抗體
A型H1N1流感病毒神經(jīng)氨酸酶抗體 Influenza A H1N1 Neuraminidase
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa生化檢測(cè)試劑盒 紅細(xì)胞膜蛋白4.2抗體
非同位素HRP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交印跡完全試劑盒 人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)elisa生化檢測(cè)試劑盒
神經(jīng)突起誘導(dǎo)因子受體UNC5B抗體 Anti-UNC5B/UNC5H2 血小板衍化生長(zhǎng)因子β抗體 Anti-PAFAH1B2
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體 ANKRD20A3
大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXⅠ)elisa檢測(cè)試劑盒 CD84
蛋白質(zhì)精氨酸亞型2抗體 Anti-PADI2/PAD2 脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體 Anti-SLC27A5鋅結(jié)合乙醇脫氫酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 ZADH2
組織ROCK-I激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C） 人肌質(zhì)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶(ATP2A1)elisa生化檢測(cè)試劑盒
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗大鼠IgG H&L Goat Anti-Rat IgG H&L / HRP
犬CD6分子(CD6)elisa生化檢測(cè)試劑盒 CD6 ELISA Kit
小鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)elisa生化檢測(cè)試劑盒 Tie-2ELISAkit
猴促腎上皮質(zhì)釋放(CRH)elisa生化檢測(cè)試劑盒 CRH ELISA kit
MDBK[NBL-1]（牛腎細(xì)胞）人二磷酸腺苷(ADP)elisa生化檢測(cè)試劑盒 ADPELISAkit
小鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)elisa檢測(cè)試劑盒 大鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)elisa生化檢測(cè)試劑盒
培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：
1. 收到細(xì)胞后首先觀(guān)察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀(guān)察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。