商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
NRK-52E:NRK52E |
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產(chǎn)品貨號 |
A01X1139 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁細胞 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
產(chǎn)品種屬 |
大鼠 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
組織來源 |
正常腎 |
用途 |
僅供科研研究實驗 |
細胞培養(yǎng)操作:
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品詳情:
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長培養(yǎng)基 DMEM+5%
FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
組織來源 正常腎
細胞類型 自發(fā)永生化細胞
生物等級 1
倍增時間 ~45 hours
受體表達情況 epidermal growth factor
(EGF); multiplication stimulating activity (MSA)
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1571 DSMZ; ACC-199 ECACC; 87012902
公司正在出售的產(chǎn)品:
SPOPL 酪蛋白激酶δ1抗體
螢火蟲熒光素酶抗體 Luciferase
透明帶黏附蛋白ZAN抗體 Anti-ZAN SPOPL蛋白抗體
神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK4抗體 Anti-SLITRK4 垂體瘤細胞凋亡抗體 Anti-RHBDD3
染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體 Anti-SUPT16H/CDC68 肌肉糖原磷酸化酶抗體 Anti-PYGM
10號染色體開放閱讀框30抗體 C10orf30
鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 Anti-NHE3/Sodium/hydrogen exchanger 3 CSNK1D
磷脂酰肌醇激酶抗體 Anti-PI3K/PI3 kinase p85 alpha subunit 辣椒素受體抗體 Anti-TRPV1/VR1雌二醇單克隆抗體 alpha Estradiol
人IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)elisa檢測試劑盒免費代測 組織PAK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
Cy3標記雞IgM Chicken IgM / Cy3
大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)elisa生化檢測試劑盒 MIP-5 ELISA Kit
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)elisa生化檢測試劑盒 MouseE-SelectinELISAkit
核苷二磷酸激酶A(NDPK-A)elisa生化檢測試劑盒 NDPK-A ELISA kit
NRK-52E大鼠腎細胞人白介素-1β前體(Pro-IL-1β)elisa生化檢測試劑盒 Pro-IL-1βELISAKit
大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa生化檢測試劑盒 小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)elisa檢測試劑盒
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。
(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細胞凍存。