商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
HuG1N:HuG1-N
產(chǎn)品貨號
AXB6601
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長特性
貼壁/懸浮
細(xì)胞形態(tài)
成團(tuán)狀懸浮、半貼壁;小的形狀不規(guī)則細(xì)胞
產(chǎn)品種屬
大鼠
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲存
組織來源
腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤
用途
僅供科研研究實驗
商品詳情:
細(xì)胞別稱;PC12未分化;大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化
種屬來源;大鼠
年齡性別;雄性
組織來源;腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤
生長特性;貼壁/懸浮
細(xì)胞形態(tài);成團(tuán)狀懸浮、半貼壁;小的形狀不規(guī)則細(xì)胞
重要提醒;注意:PC12細(xì)胞呈漂浮成簇狀生長,伴有少量松散貼壁的細(xì)胞,換液、傳代時需小心保留漂浮生長的細(xì)胞
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
背景介紹;PC-12(未分化)細(xì)胞是來自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。PC-12(未分化)細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長因子(NGF)受體,NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。PC-12(未分化)細(xì)胞不合成腎上腺素。
細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
保藏機構(gòu);中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)****中心
培養(yǎng)基;1640+5%FBS+10%馬血清+P/S
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時,進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
OIP-5/CT86 9號染色體開放閱讀框89抗體
小尾寒羊瘦素(LEP)elisa生化檢測試劑盒 LEP ELISA kit
細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 癌/睪丸抗原抗體86抗體
維生素B2比色法定量檢測試劑盒 小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)elisa生化檢測試劑盒
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體 Anti-TNFAIP1 顆粒蛋白前體抗體 Anti-PGRN/Granulin
人白介素2受體(IL2R)elisa生化檢測試劑盒 IL2RELISAkit
大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)elisa檢測試劑盒 C9orf89
外周苯二氮受體抗體 Anti-PBR/DBI/TSPO 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接蛋白1抗體 Anti-STAM溶質(zhì)載體家族25成員48抗體 slc25a48
M199培養(yǎng)基 500ml 小鼠肌**抑制素(MSTN)elisa檢測試劑盒
Cy7標(biāo)記的小鼠抗牛IgG H&L Mouse Anti-Bovine IgG H&L / Cy7
人CC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)elisa生化檢測試劑盒 HumanCCL5ELISAKit
小鼠卵泡抑素(FS)elisa生化檢測試劑盒 FSELISAKit
大鼠S100-A5蛋白(S100A5)elisa生化檢測試劑盒 S100A5 ELISA kit
PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞人胱天蛋白酶1(Casp-1)elisa生化檢測試劑盒 Casp-1ELISAKit
細(xì)胞熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗) 貓p27核心抗原(P27)elisa生化檢測試劑盒