商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
PK-13:PK13 |
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產(chǎn)品貨號(hào) |
A01X1161 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:95%空氣+5%二氧化碳; |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品種屬 |
豬 |
凍存條件 |
無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
組織來(lái)源 |
腎 |
用途 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品詳情:
細(xì)胞別稱:PK-13;豬腎細(xì)胞系
種屬來(lái)源:豬
年齡性別:成年
組織來(lái)源:腎
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介:
生物等級(jí):1
細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè):無(wú)
基因表達(dá)情況:
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CCL-33 ATCC; CRL-6593
DSMZ; ACC-640
培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
公司正在出售的產(chǎn)品:
SPANXB1 甲狀腺受體相關(guān)蛋白CRSP2抗體
環(huán)指蛋白191抗體 LONRF1/RNF191
鋅指蛋白786抗體 Anti-ZNF786 腫瘤/睪丸抗原11.2抗體
痙攣性截癱蛋白7/基質(zhì)細(xì)胞粘附調(diào)節(jié)蛋白抗體 Anti-SPG7/Paraplegin 腎胺酶抗體 Anti-Renalase
5-羥色胺受體6抗體 Anti-5HT6 Receptor/SR-6 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白2抗體 Anti-Proteasome 26S S2/TRAP2
精子成熟相關(guān)蛋白BOULE抗體 BOULE
神經(jīng)肽S受體1/G蛋白偶聯(lián)受體154抗體 Anti-NPSR1/GPR154 CRSP2
前列腺酸性磷酸酶抗體 Anti-PSAP/PAP 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β2抗體(TGFβ2) Anti-TGF beta 2 Propeptide鋅指蛋白880抗體 ZNF880
大鼠透明質(zhì)酸酶1(HYAL1)elisa檢測(cè)試劑盒 體液銅離子濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒
羅丹明標(biāo)記馬IgM Horse IgM / RBITC
大鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)elisa生化檢測(cè)試劑盒 ACA-IgG ELISA Kit
小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa生化檢測(cè)試劑盒 MouseP-SelectinELISAkit
睪酮(T)elisa生化檢測(cè)試劑盒 T ELISA Kit
PK-13豬腎細(xì)胞系人白介素32(IL-32)elisa生化檢測(cè)試劑盒 IL-32ELISAKit
體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6(AMMC)活性 小鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。