商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細(xì)胞別稱：RWPE-1；人正常前列腺上皮細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

年齡性別：男；54歲

組織來(lái)源：前列腺正常細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介：RWPE-1細(xì)胞來(lái)源于54歲白人男性。源于正常前列腺周邊組織的上皮細(xì)胞經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染HPV-18后建系得到該細(xì)胞株。在三維基質(zhì)膠培養(yǎng)時(shí)，在雄作用下，RWPE-1細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基：中分泌PSA（kallikrein 3, KLK3）。來(lái)源于RWPE-1的細(xì)胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2細(xì)胞株和 RWPE2-W99細(xì)胞株。同時(shí)，用N-甲醇-N-硝基脲處理RWPE-1，建立了一系列模擬前列腺癌進(jìn)程中不同時(shí)期的成瘤細(xì)胞株， 分別是 WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11 和 WPE1-NB26 細(xì)胞株。 據(jù)提供者報(bào)道，RWPE-1 細(xì)胞株經(jīng)過(guò)檢測(cè)，乙肝、丙肝、人缺陷病毒都呈陰性。

生物等級(jí)：2

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無(wú)

基因表達(dá)情況：cytokeratin 18, cytokeratin 8; Tumor Supressor Gene(s): p53+, pRB+

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-11609

培養(yǎng)基：K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間：~22 hours

6-芐氨基腺嘌呤（6BA）含量試劑盒       人丁型肝炎IgM(HDV IgM)elisa分析檢測(cè)試劑盒

體液HCV（HEPATITIS VIRUS C）病毒定性檢測(cè)試劑盒       大鼠血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)       大鼠甲狀腺素(T4)elisa檢測(cè)試劑盒

糖果D-葡萄糖氧化法定量檢測(cè)試劑盒       磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體 PCK1

FAM91A1蛋白抗體 FAM91A1       鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體 SNAI2

豬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)elisa檢測(cè)試劑盒       人膀胱腫瘤抗原(BTA)elisa檢測(cè)試劑盒

氯化鈣通道活性的4抗體 calcium-activated chloride channel CLCA4      EXOSC4蛋白抗體 EXOSC4

嗅覺(jué)受體5F1抗體 OR5F1       大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體 OMPC酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抗體 Acid sphingomyelinase       PE標(biāo)記人CD48單克隆抗體 human CD48/PE

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框159抗體       C1orf159

蛋白激酶錨定蛋白13單克隆抗體 AKAP13       絲氨酸蛋白酶1抗體 PRSS1

PSD95結(jié)合蛋白2抗體 DLGAP2       19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框2抗體 URI1

20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框201抗體 C20orf201       黃體釋放類似物抗體 GNRH/LHRH

雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)抗體 IBDV       組織SPHK2激酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

RWPE-1人前列腺正常細(xì)胞人H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠Toll樣受體7(TLR-7)elisa檢測(cè)試劑盒

METRNL蛋白抗體       METRNL

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。