細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代,注意消化時(shí)間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號(hào) |
A01X945 |
凍存條件 |
凍存液:90%FBS+10%DMSO |
產(chǎn)品分類 |
人細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁細(xì)胞,極少量懸浮 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
英文名稱 |
sh-sy5y:shsy5y |
組織來源 |
腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤,轉(zhuǎn)移部位骨髓 |
商品介紹:
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞,極少量懸浮
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
凍存條件
凍存液:90%FBS+10%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長(zhǎng)培養(yǎng)基:
SH-SY5Y [SHSY-5Y] 細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
注意事項(xiàng) 1.該細(xì)胞容易聚團(tuán),傳代天輕微聚團(tuán)甚至漂浮為正?,F(xiàn)象,無需換液繼續(xù)培養(yǎng)2~3天后細(xì)胞可正常貼壁;2.細(xì)胞聚團(tuán)嚴(yán)重影響細(xì)胞生長(zhǎng)后,可用胰酶消化細(xì)胞使之重新分散,傳代后少動(dòng)少換液,聚團(tuán)會(huì)有改善。
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 SH-SY5Y細(xì)胞是于1970年建自骨瘤轉(zhuǎn)移灶的神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-SH細(xì)胞系經(jīng)3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。SH-SY5Y細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性,SH-SY5Y細(xì)胞的飽和密度大于1×10^6/cm^2。
年齡(性別) 女性;4歲
組織來源 腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤,轉(zhuǎn)移部位骨髓
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
生物等級(jí) BSL-1
倍增時(shí)間 ~48-72 hours
抗原表達(dá)情況 Blood Type A; Rh+
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2266 DSMZ; ACC-209 ECACC; 94030304
?公司正在出售的產(chǎn)品:
Aβ1-42 ELISA Kit 人多肽YY(Peptide-YY)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanPeptideYY檢測(cè)試劑盒 大鼠Toll樣受體9(TLR9)elisa檢測(cè)試劑盒
Casp-9檢測(cè)試劑盒 猴β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa分析檢測(cè)試劑盒
體液?jiǎn)伟费趸?span>B型(MAO-B)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 PAP1結(jié)合蛋白抗體
C2orf84 冰凍切片ATP酶活性染色試劑盒
小鼠聚集蛋白聚糖(AGC)elisa檢測(cè)試劑盒 牛乳鐵蛋白(LTF)elisa檢測(cè)試劑盒
INO80B 2號(hào)染色體開放閱讀框84抗體
人白介素2(IL-2)elisa分析檢測(cè)試劑盒 大鼠丙酮酸激酶M2型工酶(M2-PK)elisa檢測(cè)試劑盒PRRG1 人k鏈恒定區(qū)抗體
21號(hào)染色體開放閱讀框87抗體 C21orf87
小鼠序列相似家族3成員B(FAM3B)elisa檢測(cè)試劑盒 跨膜γ羧基酸蛋白1抗體
Ig kappa chain C region 核蛋白95抗體 Anti-UHRF1
磷酯酶Cβ3 Anti-PLCB3/PLC beta3 枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶1抑制劑抗體 Anti-PROSAAS
2型豬鏈球菌溶血素抗體 Anti-SLY PE-CY5標(biāo)記的驢抗羊IgG H&L
sh-sy5y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy5 FRYL蛋白抗體
CTR1抗體 MT
培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。