商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
SK-BR-3-LUC-PURO
產(chǎn)品貨號(hào)
A01X951
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來源
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱;SK-BR-3-LUC-PURO;人乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記
種屬來源;人
組織來源;
生長特性;貼壁生長
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
背景簡介;Luciferase SK-BR-3-細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。SK-BR-3細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。SK-BR-3 [SKBR3]細(xì)胞是由Trempe·G和Old·L·J于1970年從一位43歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到的。SK-BR-3 [SKBR3]細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒、肝糖原顆粒、大溶酶體、成束的細(xì)胞質(zhì)纖絲;SK-BR-3 [SKBR3]細(xì)胞過表達(dá)HER2/c-erb-2基因產(chǎn)物。
生物等級(jí);1
細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
保藏機(jī)構(gòu);ATCC; HTB-30 DSMZ; ACC-736
培養(yǎng)基;90%5A+10%FBS+PS+1. 0ug/ml puro
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
α-GST ELISA Kit 人漢坦病毒(HV)抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒
HumanHVIgM檢測試劑盒 大鼠神經(jīng)介素U(NMU)elisa檢測試劑盒
BNP檢測試劑盒 大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)elisa分析檢測試劑盒
果菜類植酸比色法定量檢測試劑盒 鴨環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa分析檢測試劑盒
HLA-DR檢測試劑盒 體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測試劑盒
轉(zhuǎn)氫酶-2試劑盒 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)elisa檢測試劑盒
cGMP ELISA Kit 人白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)elisa分析檢測試劑盒
人板層素相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)elisa檢測試劑盒 大鼠成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)elisa檢測試劑盒NR2E1 糖原蛋白1抗體
2號(hào)染色體開放閱讀框18抗體 C2orf18
小鼠葉酸受體(FOLR)elisa檢測試劑盒 核受體蛋白NR2E1抗體
GYG1 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體 Anti-TRAF3/CD40bp
甲狀旁腺相關(guān)蛋白抗體 Anti-PTHrP/PTHLH 磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗體 Anti-phospho-PIK3R2(Tyr467)
SARM1蛋白抗體 Anti-SARM1 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗人IgG H&L
SK-BR-3+LUC人乳腺癌細(xì)胞Mouse Anti-Human IgG H&L / RBITC 慢性粒細(xì)胞白血病33抗體
粘脂蛋白1抗體 mucolipin 1