細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過(guò)紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無(wú)污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過(guò)80%時(shí)進(jìn)行傳代,注意消化時(shí)間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過(guò)STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號(hào) |
A01X950 |
凍存條件 |
無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
產(chǎn)品分類(lèi) |
人細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
英文名稱(chēng) |
SK-BR-3:SKBR3 |
組織來(lái)源 |
乳腺;;肋膜滲出液轉(zhuǎn)移灶 |
商品介紹:
細(xì)胞別稱(chēng):SK-Br-3; Sk-Br-3; SK BR 03;
SKBR-3; SKBr-3; SK-BR3; SKBr3; SkBr3; SKBR3;人乳腺癌細(xì)胞
種屬來(lái)源:人
年齡性別:女性,43歲
組織來(lái)源:乳腺;;肋膜滲出液轉(zhuǎn)移灶
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介:1970年G.
Trempe 和 L.J. Old從胸水中建立了這株細(xì)胞。沒(méi)有病毒顆粒。超微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒,肝糖原顆粒,大溶酶體,成束的細(xì)胞質(zhì)纖絲。SK-BR-3細(xì)胞株過(guò)表達(dá)HER2/c-erb-2基因產(chǎn)物。
生物等級(jí):1
細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè):無(wú)
基因表達(dá)情況:
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; HTB-30 DSMZ; ACC-736
培養(yǎng)基:90%5A+10%FBS+PS
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
倍增時(shí)間:~48-72小時(shí)
STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:11,12;D16S539:9;D18S51:10;D19S433:14;D21S11:30,30.2;D2S1338:20;D3S1358:17;D5S818:9,12;D7S820:9,12;D8S1179:12;FGA:20;TH01:8,9;TPOX:8,11;vWA:17;
?公司正在出售的產(chǎn)品:
IFN-α ELISA Kit 人多球蛋白受體(poly-IgR)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Humanpoly-IgR檢測(cè)試劑盒 大鼠血管**素樣蛋白3(ANGPTL3)elisa檢測(cè)試劑盒
Casp-7檢測(cè)試劑盒 猴α干擾素(IFN-α)elisa分析檢測(cè)試劑盒
食物糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性檢測(cè)試劑盒 INO80C蛋白抗體
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酵母DNA損傷彗星完全熒光檢測(cè)試劑盒 豚鼠白蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
INO80C 錨蛋白重復(fù)域54抗體
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)elisa檢測(cè)試劑盒 大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子7(FGF7)elisa檢測(cè)試劑盒PRRG2 鈣粘樣蛋白28抗體
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體 C2ORF25
小鼠胰島素(INS)elisa檢測(cè)試劑盒 跨膜γ羧基酸蛋白2抗體
CDHR3 泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗體 Anti-UCHL5IP
B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白抗體 Anti-PHB2/REA/Prohibitin 2 帕金森病相關(guān)蛋白ATP13A2抗體 Anti-PARK9/ATP13A2
琥珀酸脫氫酶復(fù)合體亞基A抗體 Anti-SDHA PE-Cy3標(biāo)記的驢抗羊IgG H&L
SK-BR-3人乳腺癌細(xì)胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy3 鋅指蛋白909抗體
粘脂蛋白3抗體 mucolipin 3
培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由 客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。