細(xì)胞系實驗步驟：

?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?：
?生物柜的使用?：確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外，防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?：提供細(xì)胞生長的環(huán)境，保持恒定的溫度（通常為37℃）?。
?培養(yǎng)基和血清?：特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì)，如糖、氨基酸和維生素，添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?：
?細(xì)胞接收與記錄?：記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息，包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?：定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為，確保細(xì)胞狀態(tài)健康，無污染?。
?細(xì)胞傳代?：當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時進(jìn)行傳代，注意消化時間和條件，避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?：
?細(xì)胞系鑒定?：通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征，防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?：定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存，確保細(xì)胞的長期存活和可用性?。

本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

商品屬性：

產(chǎn)品貨號	A01X957	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系	產(chǎn)品種屬	人
生長特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	多邊形
英文名稱	SK-MEL-28:SKMEL28	組織來源	皮膚

商品介紹：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 多邊形

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）

生長培養(yǎng)基:MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:8

推薦換液頻率 2-3天/次

參考資料(來源文獻(xiàn))

年齡（性別） 男性；51歲

組織來源 皮膚

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 皮膚黑色素瘤

生物等級 BSL-1

倍增時間 27 hours (PubMed=7718330); 72 hours (PubMed=12479222); 26.9 hours (PubMed=20406486); 35.1 hours (NCI-DTP).

致瘤性 Yes; Yes, in nude mice; forms malignant melanoma (large round cell type)

保藏機(jī)構(gòu) AddexBio; C0020001/66 ATCC; HTB-72 BCRJ; 0289 CLS; 300337 ICLC; HTL99010 NCI-DTP; SK-MEL-28 RCB; RCB1930 - Discontinued TKG; TKG 0333

?公司正在出售的產(chǎn)品：

25 HVD3 ELISA kit       人多巴胺D1受體(D1R)elisa分析檢測試劑盒

HumanD1R檢測試劑盒       魚白介素10(IL-10)elisa分析檢測試劑盒

BMP-6檢測試劑盒       猴25羥基維生素D3(25 HVD3)elisa分析檢測試劑盒

人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白（NGAL）elisa檢測試劑盒       聚磷酸肌醇磷酸酶4B抗體

C4orf3       血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（ACE）總活性熒光定量檢測試劑盒

大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)elisa檢測試劑盒       組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測試劑盒

INPP4B      4號染色體開放閱讀框3抗體

人兒茶酚抑素elisa分析檢測試劑盒       大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)elisa分析檢測試劑盒PRTG       線粒體內(nèi)膜蛋白酶樣IMP2抗體

4號染色體開放閱讀框17抗體       C4orf17

魚雌二醇(E2)elisa檢測試劑盒       PRTG蛋白抗體

IMMP2L       泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體  Anti-UBE2A/UBE2B/RAD6

神經(jīng)叢蛋白B2抗體  Anti-Plexin B2       植烷酰輔酶A羥化酶2相互作用蛋白抗體  Anti-PHYHIP

乳酸表面蛋白抗體  Anti-surface layer protein       PE標(biāo)記的驢抗人IgG H&L

SK-MEL-28人皮膚黑色素瘤細(xì)胞Donkey Anti-Human IgG H&L / PE       FSTL3/FLRG蛋白抗體

氨基甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體       NAGS

培養(yǎng)注意事項 ：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。