商品屬性：

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 多邊形

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認）

生長培養(yǎng)基:

DMEM＋10% FBS＋1%P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:6

推薦換液頻率 2-3天/次

參考資料(來源文獻)

年齡（性別） 男性；60歲

組織來源 皮膚

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 黑色素瘤細胞

生物等級 BSL-1

倍增時間 32 hours (PubMed=7718330); 45.5 hours (NCI-DTP); ~56 hours (PBCF)

抗原表達情況 Blood Type A; Rh+

保藏機構 ATCC; HTB-68 CLS; 300423 KCLB; 30068 NCI-DTP; SK-MEL-2

cath-K ELISA Kit       人多巴胺(DA)elisa分析檢測試劑盒

DA檢測試劑盒       活體細胞氧化應激活性氧（ROS）原位熒光染色試劑盒（羥自由基）

BMPs檢測試劑盒       倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)elisa分析檢測試劑盒

小鼠DAB2互作蛋白(DAB2IP)elisa分析檢測試劑盒       聚磷酸肌醇磷酸酶5E抗體

ANKS1B       細胞基質(zhì)金屬（MMP-10）活性熒光定量檢測試劑盒

大鼠血管緊張素原(aGT)elisa檢測試劑盒免費代測       果菜檸檬酸比色法定量檢測試劑盒

INPP5E      β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結構域相關蛋白1抗體

人鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)elisa檢測試劑盒       大鼠谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶P(GSTP1)elisa檢測試劑盒PSCD4       周期素依賴性激酶11抗體

4號染色體開放閱讀框33抗體       C4orf33

魚透明質(zhì)酸(HA)elisa分析檢測試劑盒       胞粘蛋白4抗體

CDK11       泛素結合酶E2O抗體  Anti-UBE2O/E2 230K

多型性腺瘤基因樣蛋白1抗體  Anti-PLAGL1/ZAC1       旁瘤抗原MA1抗體  Anti-PNMA1

解旋酶SNF2L抗體  Anti-SMARCA1/SNF2L       PE-Cy3標記的驢抗人IgG H&L

SK-MEL-2人皮膚黑色素瘤細胞Donkey Anti-Human IgG H&L / PE-Cy3       鋅指蛋白ZBTB3抗體

腦特異性蛋白BPX抗體       NAP1L2

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。