商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
SK-N-AS
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB6656
培養(yǎng)條件
DMEM+ O.1 mM Non-Essential
Amino Acids (NEAA)+fetal bovine serum to a final concentration of 10%37 ℃, 5% CO2
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
90% FBS + 10% DMSO
組織來(lái)源
腦
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
種屬來(lái)源;人
組織來(lái)源;腦
性別年齡;6歲,女性
生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞規(guī)格;1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件;DMEM+ O.1 mM Non-Essential
Amino Acids (NEAA)+fetal bovine serum to a final concentration of 10%37 ℃, 5% CO2
凍存條件;90% FBS + 10% DMSO
傳代方法;1:3傳代,
2-3天傳1代
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
pre-α1-AT ELISA Kit 人過(guò)氧化氫酶(CAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
CAT檢測(cè)試劑盒 細(xì)胞SPHK激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(510)
eNOS-3檢測(cè)試劑盒 大鼠α1抗胰蛋白酶前體(pre-α1-AT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)elisa檢測(cè)試劑盒 孕/孕酮(PROG)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanILF2檢測(cè)試劑盒 組織ABL1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
人白介素24(IL-24)elisa檢測(cè)試劑盒 大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa檢測(cè)試劑盒
PROG ELISA kit 人白介素增強(qiáng)子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人核基質(zhì)蛋白22(NMP22)elisa檢測(cè)試劑盒 大鼠花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)elisa檢測(cè)試劑盒NSMase2 甲型流感病毒(H2N2)血凝素抗體
5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體 C5orf54
植物維生素D2(VD2)elisa分析檢測(cè)試劑盒 中性鞘磷脂2抗體
H2N2 Hemagglutinin TRIM50蛋白抗體 Anti-TRIM50
脯氨酸羥化酶抗體 Anti-PHD3 6磷酸果糖激酶抗體 Anti-PFKL/Fructose 6 Phosphate Kinase
絲氨酸蛋白酶抑制劑A10抗體 Anti-ZPI/SERPINA10 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM
SK-N-AS人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞Mouse Anti-Rabbit IgM / Cy5.5 鈣粘蛋白15抗體
胰島素樣肽5 a鏈抗體 INSL5 A chain