商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
英文名稱(chēng) |
SK-NEP-1:SKNEP1 |
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產(chǎn)品貨號(hào) |
A01X961 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長(zhǎng)特性 |
懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
圓形 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
組織來(lái)源 |
腎,肋膜滲出液 |
用途 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品詳情:
生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 圓形
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 McCoy’s 5A+15% FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL
推薦換液頻率 2~3次/周
注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液;請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。
背景描述 SK-NEP-1細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)有少許微絨毛、連接復(fù)合物、形態(tài)完整的高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)多為光滑型、脂滴;沒(méi)有病毒棵粒。
年齡(性別) 女;25歲
組織來(lái)源 腎,肋膜滲出液
細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類(lèi)型 腎癌細(xì)胞
生物等級(jí) 1
致瘤性 Yes, in nude mice; forms tumor
with small cells consistent with Wilms' tumor.
抗原表達(dá)情況 Blood Type A; Rh+
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-48
公司正在出售的產(chǎn)品:
C1Q and collagen domain containing(ADIPOQ)ELISA kit 人對(duì)稱(chēng)二甲基精氨酸(SMDA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanSymmetricdimethylarginine(SMDA)檢測(cè)試劑盒 血液甘露醇含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
MouseC-terminalpeptideofbone-specificalkalinephosphatase檢測(cè)試劑盒 倉(cāng)鼠脂聯(lián)素,含C1Q和膠原域(ADIPOQ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
銀染法細(xì)胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒 胰島素樣肽5 a鏈抗體
C5orf54 細(xì)胞SPRK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
豚鼠白三烯D4(LTD4)elisa檢測(cè)試劑盒 大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)elisa檢測(cè)試劑盒
INSL5 A chain 5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體
人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)elisa分析檢測(cè)試劑盒 大鼠肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)elisa檢測(cè)試劑盒PSMD11 生長(zhǎng)抑制蛋白3抗體
5-羥色胺受體1E抗體 5HT1E Receptor
豬β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa分析檢測(cè)試劑盒 26S蛋白酶體非ATP酶調(diào)節(jié)亞基11抗體
ING3 泛素蛋白連接酶W抗體 Anti-UBE2W
含脯氨酸突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體 Anti-ProSAPiP1 蛋白酪氨酸磷酸酶PTPσ抗體 Anti-PTPRS
神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體 Anti-SLIT2/Slil3 Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG H&L
SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞Donkey Anti-Human IgG H&L / Cy3 腫瘤/睪丸抗原38抗體
組蛋白H2A/S抗體 HIST1H2AH
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。