商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 圓形

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 McCoy’s 5A＋15% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液；請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

背景描述 SK-NEP-1細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)有少許微絨毛、連接復(fù)合物、形態(tài)完整的高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)多為光滑型、脂滴；沒(méi)有病毒棵粒。

年齡（性別） 女；25歲

組織來(lái)源 腎，肋膜滲出液

細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類(lèi)型 腎癌細(xì)胞

生物等級(jí) 1

致瘤性 Yes, in nude mice; forms tumor with small cells consistent with Wilms' tumor.

抗原表達(dá)情況 Blood Type A; Rh+

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-48

C1Q and collagen domain containing(ADIPOQ)ELISA kit       人對(duì)稱(chēng)二甲基精氨酸(SMDA)elisa分析檢測(cè)試劑盒

HumanSymmetricdimethylarginine(SMDA)檢測(cè)試劑盒       血液甘露醇含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

MouseC-terminalpeptideofbone-specificalkalinephosphatase檢測(cè)試劑盒       倉(cāng)鼠脂聯(lián)素,含C1Q和膠原域(ADIPOQ)elisa分析檢測(cè)試劑盒

銀染法細(xì)胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒       胰島素樣肽5 a鏈抗體

C5orf54       細(xì)胞SPRK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

豚鼠白三烯D4(LTD4)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)elisa檢測(cè)試劑盒

INSL5 A chain      5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體

人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)elisa分析檢測(cè)試劑盒       大鼠肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)elisa檢測(cè)試劑盒PSMD11       生長(zhǎng)抑制蛋白3抗體

5-羥色胺受體1E抗體       5HT1E Receptor

豬β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa分析檢測(cè)試劑盒       26S蛋白酶體非ATP酶調(diào)節(jié)亞基11抗體

ING3       泛素蛋白連接酶W抗體  Anti-UBE2W

含脯氨酸突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體  Anti-ProSAPiP1       蛋白酪氨酸磷酸酶PTPσ抗體  Anti-PTPRS

神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體  Anti-SLIT2/Slil3       Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG H&L

SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞Donkey Anti-Human IgG H&L / Cy3       腫瘤/睪丸抗原38抗體

組蛋白H2A/S抗體       HIST1H2AH

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。