細胞系實驗步驟:
?一、細胞培養(yǎng)準備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質,如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養(yǎng)過程?:
?細胞接收與記錄?:記錄細胞系的相關信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細胞形態(tài)觀察?:定期檢查細胞的形態(tài)和行為,確保細胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細胞傳代?:當細胞密度超過80%時進行傳代,注意消化時間和條件,避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?:
?細胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征,防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?:定期進行細胞冷凍保存,確保細胞的長期存活和可用性?。
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商品屬性:
產品貨號 |
A01X960 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
產品分類 |
人細胞系 |
產品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁細胞 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
英文名稱 |
SK-N-MC:SKNMC |
組織來源 |
腦;眶上區(qū)神經上皮瘤轉移灶 |
商品介紹:
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長培養(yǎng)基 MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 SK-N-MC細胞是由Biedler·J·L建立的兩株神經組織來源的細胞中的一株(另一株是SK-N-SH細胞);于1971年9月分離得到。SK-N-MC細胞有中度的多巴胺-β-羥化酶活性,也有可用甲醛誘導熒光指示的細胞內兒茶酚胺。初被認為是神經母細胞瘤細胞系,但后來被證明來自于Askin腫瘤。
年齡(性別) 女;14歲
組織來源 腦;眶上區(qū)神經上皮瘤轉移灶
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 神經母細胞瘤細胞
生物等級 1
倍增時間 ~32-48 hours
致瘤性 Yes, in hamster cheek.Yes, in
nude mice.
抗原表達情況 Blood Type O; Rh+
保藏機構 ATCC; HTB-10 DSMZ; ACC-203 ECACC; 90022302
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磷酸化磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 Anti-phospho-RPS6KA1(Thr348) 一氧化氮合成酶-2抗體(誘導型) Anti-iNOS
細胞信號轉導分子Smad-1抗體 Anti-Smad1 Cy7標記的兔抗人IgM
SK-N-MC人神經上皮瘤細胞Rabbit Anti-Human IgM / Cy7 內質網凝集素1抗體
乙?;M蛋白H2B K15抗體 Histone H2B (acetyl K15)
培養(yǎng)注意事項 :
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發(fā)生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。