商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
SNU-1076 |
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產(chǎn)品貨號(hào) |
AXB6666 |
培養(yǎng)條件 |
RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
凍存條件 |
90% FBS + 10% DMSO |
組織來源 |
喉部 |
用途 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品詳情:
種屬來源;人
組織來源;喉部
性別年齡;60歲,韓國(guó)男性
生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞規(guī)格;1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件;RPMI1640 +10% fetal bovine
serum37 ℃, 5% CO2
凍存條件;90% FBS + 10% DMSO
傳代方法;1:3傳代, 2-3天傳1代
公司正在出售的產(chǎn)品:
FE ELISA kit 人端粒酶(TE)elisa分析檢測(cè)試劑盒
TE檢測(cè)試劑盒 人EB病毒核抗原3A抗體(IgM)elisa檢測(cè)試劑盒
BMPR-Ⅱ檢測(cè)試劑盒 倉(cāng)鼠鐵蛋白(FE)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)elisa分析檢測(cè)試劑盒 干擾素α11抗體
Anterior Gradient 2 細(xì)胞中鏈脂酰氧化酶(acyl-CoA oxidase)
細(xì)胞CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 小鼠趨化因子配體1(CCL1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Interferon alpha 11 前梯度源蛋白2抗體
水樣中六價(jià)鉻離子(Cr6+)濃度測(cè)試盒 大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)elisa檢測(cè)試劑盒PSMF1 鈣反應(yīng)因子抗體
8號(hào)染色體開放閱讀框31抗體 C8orf31
石蠟切片組織線粒體DNA萃取試劑盒 蛋白酶體抑制劑亞基PI31抗體
CDKN2AIP 泛素蛋白連接酶G2抗體 Anti-Ube2G2/UBC7
原鈣粘蛋白γB4抗體 Anti-PCDHGB4 蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基5C/PP2A-B56-γ抗體 Anti-PPP2R5C
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 Anti-SMC2 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的驢抗羊IgG H&L
SNU-1076人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / AP 鋅指蛋白297B抗體
間變性瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 NIPA
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。