培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠成骨細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
顱骨組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
梭形、多角形
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1647
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠成骨細(xì)胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護(hù)和支持腦、感覺(jué)器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架，共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建，骨重建過(guò)程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過(guò)程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，也是篩選、生物材料開(kāi)發(fā)和生物工程研究的重要手段。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠成骨細(xì)胞采用先用胰蛋白酶短時(shí)間消化、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠成骨細(xì)胞經(jīng)ALP染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
eosinophil-derivedneurotoxin)(RNASE2)ELISAkit
猴促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
ACTH ELISA kit
人二羥基賴正己氨酸(DHLNL)elisa分析檢測(cè)試劑盒
DHLNLELISAkit
β-Actin 100ul
（SCHMORL）直接染色試劑盒
兔膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CHAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
通用型精（arginine）含量化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒
INE1蛋白抗體
INE1
補(bǔ)體C1qTNF9鏈多肽抗體
C1QTNF9
細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
犬α1微球蛋白(α1-MG)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠12羥二十烷四烯酸(12-HETE)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
蛋白酶體PSMβ6抗體
Proteasome 20S beta 6
細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)源蛋白122抗體
IFT122
肌營(yíng)養(yǎng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體 Anti-Utrophin
血小板衍化生長(zhǎng)因子γ抗體 Anti-PAFAH1B3/PAFAHG
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基5抗體 Anti-p16 ARC/ARPC5
分揀微管連接蛋白抗體 Anti-SNX25
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的驢抗羊IgG H&L
大鼠成骨細(xì)胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / HRP
FRG2B蛋白抗體
F protein binding protein 1; bA165P4.3; FBP; GTPase RAB 14; RAB-14; RAB14 member RAS oncogene family; RAB14_HUMAN; Ras related protein Rab 14; Ras-related protein Rab-14; RP11 165P4.4; Small GTP binding protein RAB14; FBP.
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
豬主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞
786-O[786-0]人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。