培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠肝實質(zhì)細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肝臟組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1569
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
大鼠肝實質(zhì)細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也**消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細胞是指具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝實質(zhì)細胞與主要病生理變化：急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實質(zhì)細胞屬于中高度分化細胞，生長營養(yǎng)需求高，在體外存活時間短；細胞呈圓形或多角形，核大而圓，居中，常染色質(zhì)豐富，部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官，在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠肝實質(zhì)細胞采用混合酶灌流消化、反復低速離心制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠肝實質(zhì)細胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Mousesulfatide(SULF)antibodyELISAkit
大鼠Rho相關GTP結(jié)合蛋白RhoE elisa分析檢測試劑盒
Rat Rho-related GTP Binding Protein RhoE ELISA Kit
人胱硫醚β-合酶(CBS)elisa分析檢測試劑盒
CBSELISAKit
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)elisa檢測試劑盒
6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶（6PGDH）測試盒
CASPASE-2蛋白表達西方雜交分析試劑盒
丙酮酸（PA）測試盒
小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)elisa分析檢測試劑盒
POMC ELISA kit
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)elisa分析檢測試劑盒
HumanIL-2sRβELISAKit
轉(zhuǎn)基因棉花GK19品系基因檢測試劑盒
小鼠SCAF11蛋白(SFRS2IP/CASP11)elisa檢測試劑盒
大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)elisa檢測試劑盒
石蠟切片組織HISTONE H3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體
Oncomodulin
人巨細胞病毒UL49蛋白抗體
HCMV UL49
胸腺肽α1抗體 Anti-Thymosin Alpha-1/PTMA
腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 Anti-PEPT2/SLC15A2
鞘脂激活蛋白原抗體 Anti-PSAP
T細胞識別的鱗狀細胞抗原抗體 Anti-SART1
PE標記的小鼠抗牛IgG H&L
大鼠肝實質(zhì)細胞Mouse Anti-Bovine IgG H&L / PE
FBX47蛋白抗體
Toll-like receptor 9; CD 289; CD289; TLR 9; Toll like receptor 9; Toll like receptor 9 isoform A precursor; Toll like receptor 9 isoform B; TLR9_HUMAN.
大鼠肝星狀細胞
豬腎小管上皮細胞
A549 人肺癌細胞
8305C人甲狀腺癌細胞8305C（未分化）
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。