產(chǎn)品名稱
大鼠海綿體內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
海綿體組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
內(nèi)皮細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1639
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
大鼠海綿體內(nèi)皮細胞分離自海綿體組織；海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構(gòu)成的血竇結(jié)構(gòu)，它主要包括海綿體內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質(zhì)的膠原中，而海綿體內(nèi)皮細胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面，僅占海綿體組織的2.8%。在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細胞與基膜的聯(lián)系，破壞海綿體內(nèi)皮細胞間的緊密連接。如果消化時間延長或膠原酶濃度過大，平滑肌細胞和成纖維細胞也將被消化下來，從而影響海綿體內(nèi)皮細胞的純度。因此，比較篩選合適的膠原酶濃度和消化時間是成功分離海綿體內(nèi)皮細胞的關(guān)鍵。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠海綿體內(nèi)皮細胞采用混合酶消化法結(jié)合機械分離法、并用內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠海綿體內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
P-PKBELISAKit
大鼠N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR2 elisa分析檢測試劑盒
Rat N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2 (NR2) ELISA Kit
人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析檢測試劑盒
OT/BGPELISAkit
大鼠皮質(zhì)酮（CORT）elisa檢測試劑盒
CD56-APC
土壤淀粉酶測試盒
通用型密執(zhí)安棒形桿菌狡詐亞種Clavibacter michiganensis subsp. insidiosus；CMI）基因檢測試劑盒
三聚氰胺ELISA快速檢測試劑盒
Melamine ELISA Kit
人白介素2(IL-2)抗體elisa分析檢測試劑盒
HumanIL-2antibodyELISAKit
β-葡萄糖苷酶（β-GC）/纖維二糖水解酶測試盒
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)elisa檢測試劑盒
貓雌二醇(E2)elisa分析檢測試劑盒
強化染色試劑盒
OSGIN2蛋白抗體
OSGIN2
HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白7A蛋白抗體
HEATR7A
微管蛋白γ/Tubulin γ抗體 Anti-gamma tubulin (Centrosome Marker )
肝磷酸酯酶2抗體 Anti-PRL2/PTP4A2
磷酸酯酶3蛋白抗體 Anti-PRL3/PRL-R
絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白1抗體 Anti-SRRM1
辣根過氧化物酶標記的小鼠抗大鼠IgG H&L
大鼠海綿體內(nèi)皮細胞Mouse Anti-Rat IgG H&L / HRP
FbxL7蛋白抗體
cytoskeletal-associated protein tyrosine phosphatase; protein tyrosine phosphatase H1; protein tyrosine phosphatase non-receptor type 3; Protein-tyrosine phosphatase H1; PTN3_HUMAN; PTP H1; PTP-H1; PTPH1; PTPN3; Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 3.
大鼠海綿體平滑肌細胞
豬肺微血管內(nèi)皮細胞
BEWO人胎盤絨毛膜癌細胞
A-427人非小細胞肺癌細胞