細(xì)胞簡介：
大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu)，各種關(guān)節(jié)內(nèi)均會累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，同時在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎（OA）以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關(guān)節(jié)的退變?；ぜ?xì)胞是構(gòu)成滑膜層的大細(xì)胞群體，是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中，基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布?；び?span>A型（巨噬樣滑膜細(xì)胞）、B型（成纖維樣滑膜細(xì)胞）以及C型（樹突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞）細(xì)胞組成。滑膜細(xì)胞主要功能：①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān)；②滑膜細(xì)胞增生，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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滑膜組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1665 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞采用膠原酶消化法和低密度接種法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
實(shí)驗(yàn)具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時間根據(jù)正常細(xì)胞消化時間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細(xì)胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實(shí)驗(yàn)方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡便、快速，但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)elisa檢測試劑盒
小鼠核因子κB受體活化劑配體（RANKL）elisa檢測試劑盒
大鼠AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)elisa檢測試劑盒
人體BRCA－2基因甲基化檢測試劑盒
人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)elisa分析檢測試劑盒
人1,3-βD葡葡糖苷酶elisa檢測試劑盒
COLLAGEN I蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
小鼠白細(xì)胞介素16(IL-16)elisa檢測試劑盒
大鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(5-HTT/SERT)elisa分析檢測試劑盒
抑制素βC抗體 Inhibin Beta C
原鈣粘附蛋白α9抗體 PCDHA9
范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體 FANCC
輔酶細(xì)胞色素C還原復(fù)合酶抗體 UCRC
G蛋白偶聯(lián)受體136抗體 GPR136
G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子8抗體 RGS8
內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體 Epsin 2
膀胱癌突變蛋白1抗體 CCDC112
AF680標(biāo)記的神經(jīng)元素3抗體 Neurogenin3, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750標(biāo)記的周期素依賴性激酶2抗體 CDK2, Alexa Fluor 750 conjugated
緊密連接蛋白4抗體 Claudin 4
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 CCDC12
?磷酸葡萄糖變位酶/?-phosphoglucomutase抗體
TRIM46蛋白抗體 TRIM46
突觸相關(guān)蛋白23重組兔單克隆抗體 SNAP23
味覺受體蛋白家族10亞基5抗體 OR10A5
猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)elisa分析檢測試劑盒
大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞食物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)elisa分析檢測試劑盒
DENV2; Dengue virus type 2 (strain China/D2-04); Dengue virus 2; DENV-2; Dengue virus type 2 (strain D2-04); Dengue virus type 2 China/D2-04; Dengue virus 2 China/D2-04; POLG_DEN2D; Genome polyprotein; DEN2;
大鼠肌腱成纖維細(xì)胞
以下?lián)Q模版
BT-549人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
A-498人腎細(xì)胞癌細(xì)胞