產(chǎn)品名稱
大鼠肌腱成纖維細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肌腱組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1668
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
大鼠肌腱成纖維細胞分離自肌腱組織；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結締組織，便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構成，色紅質軟，有收縮能力，肌腱由致密結締組織構成，色乳白較硬，沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀，闊肌的肌腱闊而薄，呈膜狀，又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌，而肌腱即為白肌，分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠肌腱成纖維細胞采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠肌腱成纖維細胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
犬N端前腦鈉素(NT-proBNP)elisa檢測試劑盒
干擾素α11抗體
Interferon alpha 11
前梯度源蛋白2抗體
Anterior Gradient 2
基因組DNA體外完全甲基化（sss1）處理試劑盒
DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T
食物甘素（dulcin）含量薄層色譜法定性檢測試劑盒
小鼠叉頭框蛋白03(FoxP3)elisa分析檢測試劑盒
MRGPRX4蛋白抗體
MRGPRX4
20號染色體開放閱讀框151抗體
C20orf151
甲狀腺受體相關蛋白220抗體 Anti-TRAP220/MED1
ras癌基因家族Rab11蛋白抗體 Anti-Rab11
鈉氯離子轉運蛋白抗體 Anti-SLC12A3/NCCT
唾液酸結合性球蛋白樣凝集素抗體 Anti-SIGLEC10/SLG2
泛素結合酶E2J1抗體
UBE2J1
防御素β-114/β-defensin 114抗體
DEFB114
膽固醇調(diào)節(jié)元件結合蛋白1抗體 Anti-SREBP-1
嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體 Anti-NCF/NCF4/p40phox
線粒體導肽水解酶β抗體 Anti-PMPCB
瞬時受體電位通道蛋白4抗體 Anti-CABP4
大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷酶IA(MAN1A1)elisa分析檢測試劑盒
大鼠肌腱成纖維細胞MAN1A1 ELISA kit
豚鼠膽堿脂酶(CHE)elisa分析檢測試劑盒
Bridge-1; MGC8644; 26S proteasome non ATPase regulatory subunit 9; 26S proteasome regulatory subunit p27; Homolog of rat Bridge 1; p27; Proteasome (prosome macropain) 26S subunit non ATPase 9; Proteasome 26S non ATPase regulatory subunit 9; Proteasome 26S subunit non ATPase 9; PSMD 9; Rpn4; PSMD9_HUMAN.
大鼠肌腱干細胞
羊主動脈平滑肌細胞
BxPC-3人原位胰腺腺癌細胞