培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
大鼠卵泡膜細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
卵巢組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類(lèi)
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1638
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠卵泡膜細(xì)胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類(lèi)固醇。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢，但是部分魚(yú)類(lèi)的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu)，而所有鳥(niǎo)類(lèi)只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周?chē)糠郑饕陕雅莺徒Y(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、管和神經(jīng)。哺乳動(dòng)物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)的調(diào)節(jié)才能完成，垂體（卵泡刺和黃體**素）使原始卵泡開(kāi)始發(fā)育，其過(guò)程中還產(chǎn)生大量的雌。雌是卵巢的顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞在垂體的作用下協(xié)同合成的，卵泡膜細(xì)胞合成的雄透過(guò)基膜進(jìn)入顆粒細(xì)胞，并轉(zhuǎn)變?yōu)榇?。因此，卵泡膜?xì)胞在生殖***調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置，了解其在病理及生理中的作用，對(duì)于與性有關(guān)的婦產(chǎn)科（如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等）的研究有著重要意義。在哺乳動(dòng)物卵泡生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程中，卵母細(xì)胞由不斷增加的顆粒細(xì)胞層包裹。卵巢組織中的膜細(xì)胞作為卵泡的外層細(xì)胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性，參與構(gòu)成卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境且為類(lèi)固醇的**提供底物。在哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)膜細(xì)胞類(lèi)固醇**的機(jī)制已見(jiàn)相關(guān)報(bào)道，但是有關(guān)卵泡膜細(xì)胞的聚集、生長(zhǎng)和分化的研究尚不深入。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡膜細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡膜細(xì)胞經(jīng)3β-HSD熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
IFN-α1ELISAKit
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析檢測(cè)試劑盒
IL-8 ELISA Kit
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanALCAMELISAKit
磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體 Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020)
G蛋白結(jié)合蛋白RAB38抗體 Anti-RAB38
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因H4抗體 Anti-NME4/nm23-H4
軟骨細(xì)胞蛋白39抗體 Anti-YKL39/CHI3L2
磷脂酸磷酸酶LPIN2抗體
Lipin 2
Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體
BLM
彈性蛋白酶抑制劑抗體 Anti-SKALP/Elafin
抵抗素樣分子α抗體 Anti-RELMa/RELM alpha
利鈉肽受體A抗體 Anti-Natriuretic Peptide Receptor A
鋅指蛋白568抗體 Anti-ZNF568
肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體
SNTG2
糞生素氧化酶CPOX抗體
CPOX
跨膜蛋白SEMA5B抗體 Anti-SEMA5B/Semaphorin 5B
脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體 Anti-Perilipin A
核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 Anti-ENPP1/PC1/3
腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體 Anti-TNFSF4/CD252
羅丹明標(biāo)記小鼠IgG（型對(duì)照)
大鼠卵泡膜細(xì)胞Mouse IgG / RBITC
鋅指蛋白83抗體
Forkhead box protein J1; FOXJ-1; winged helix; FOXJ1; FKHL13; HFH-4; HFH4; MGC35202; forkhead box J1; Forkhead Homologue 4; Forkhead related protein FKHL13; Fox J1; Hepatocyte nuclear factor 3 forkhead homolog 4; HNF-3/forkhead homolog 4; FOXJ1_HUMAN.
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
鴨肝間質(zhì)細(xì)胞
CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞
ACHN人腎細(xì)胞癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。