
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
大鼠腦膜細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腦膜組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1700
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
大鼠腦膜細胞分離自腦膜組織;腦膜是顱骨與腦間的隔膜,一共有三層,由外向內為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細胞圍繞著大腦,參與神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育,能穩(wěn)定腦軟膜表面的細胞外基質、組織放射狀膠質細胞網(wǎng)絡和小腦皮層分層結構。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腦膜細胞采用胰蛋白酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腦膜細胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
人基質金屬蛋白酶10(MMP-10)elisa分析檢測試劑盒
IRG1蛋白抗體
IRG1
氣味結合蛋白抗體
Aphrodisin
人蛋白激酶B(PKB)elisa檢測試劑盒
HSV1(HERPES SIMPLX1)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒
亞油酸含量試劑盒(HPLC)
大鼠熱休克蛋白 70(HSP70)elisa檢測試劑盒
蛋白激酶MST1/2抗體
MST1/MST2
21號染色體開放閱讀框37抗體
C21orf37
腫瘤壞死因子受體相關蛋白4抗體 Anti-TRAF4/CART 1
視網(wǎng)膜母細胞瘤結合蛋白P48抗體 Anti-RbAp48
磷酸化谷氨酸受體2A抗體 Anti-Phospho-NMDAR2A (Tyr1325)
磷酸化細胞信號轉導分子Smad-1/5抗體 Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)
轉錄輔助因子退變樣蛋白1抗體
VGLL1
肌營養(yǎng)蛋白δ/δ-sarcoglycan抗體
delta Sarcoglycan
性結合球蛋白抗體 Anti-SHBG
鈉離子/?;悄懰峁厕D運蛋白抗體 Anti-NTCP/SLC10A1
視網(wǎng)膜母細胞瘤樣蛋白2抗體 Anti-RBR2/Rb2 p130
TSK蛋白抗體 Anti-TSK/Tsukushin/LRRC54
大鼠脯氨酸羥化酶(PHD)elisa分析檢測試劑盒
大鼠腦膜細胞PHD ELISA Kit
豚鼠白介素18(IL-18)elisa分析檢測試劑盒
MGLUR1+MGLUR5; GPRC1A; GPRC1E; GRM1A; Metabotropic glutamate receptor 1; Metabotropic glutamate receptor 5; mGlu1; mGlu5; MGLUR1; MGLUR1A; MGLUR5; MGLUR5B; GRM1_HUMAN; GRM5_HUMAN.
大鼠腦微血管內皮細胞
小鼠主動脈平滑肌細胞
COLO205人結腸癌細胞
AML-12小鼠肝實質細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。