培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
大鼠軟骨細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
軟骨組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
梭形、多角形
分類(lèi)
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1648
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠軟骨細(xì)胞分離自軟骨組織；軟骨組織由軟骨細(xì)胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強(qiáng)，這些增生的幼稚細(xì)胞形似纖維母細(xì)胞，以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣?xì)胞，并形成軟骨基質(zhì)，細(xì)胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細(xì)胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同，可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種，其中以透明軟骨的分布較廣，結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細(xì)胞（chondrocyte）位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個(gè)分布，體積較小，呈橢圓形，長(zhǎng)軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見(jiàn)數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成，稱(chēng)為同源細(xì)胞群。電鏡下，軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠軟骨細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠軟骨細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
細(xì)胞APC蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠游離脂肪酸(FFA)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠抗IVIgG抗體elisa檢測(cè)試劑盒
組蛋白脫乙?；?span>9（HDAC9）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
人脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白（aFABP）elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)elisa檢測(cè)試劑盒
N-甲酰蛋氨酰氨肽酶（N－formylmethionyl aminopeptidase）
食物總抗氧化能力（TAC）比色法（DDPH）定量檢測(cè)試劑盒
前列腺酸性磷酸酶PACP測(cè)試盒 50管/25樣 比色法
細(xì)胞色素P450 8B1抗體 CYP8B1
細(xì)胞周期相關(guān)激酶抗體 CCRK
ZFY19抗體 ZFY19
β-酮脂酰合成酶/β-ketoacyl synthase抗體 OXSM
ATP5E蛋白抗體 ATP5E
BF594標(biāo)記的乳腺癌膜蛋白11/前梯度源蛋白3抗體 BCMP11, AbBy Fluor 594 conjugated
跨膜蛋白SEMA4F抗體 SEMA4F
酪酪肽抗體 PYY
脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白單克隆抗體 FABP4
腫瘤壞死因子配體超家族成員10C DcR1
肝腸鈣粘連蛋白重組兔單克隆抗體 CDH17／LI-cadherin
高遷移率族蛋白20A抗體 HMG20A
KIAA1161蛋白抗體 KIAA1161
LSM10相關(guān)蛋白抗體 LSM10
醛固酮類(lèi)還原酶家族7成員A2抗體 AKR7A2
溶質(zhì)載體家族蛋白2成員A13抗體 SLC2A13
人γ-氨基丁酸（GABA）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠軟骨細(xì)胞純化線粒體NADH氧化酶活性定量檢測(cè)試劑盒
小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa分析檢測(cè)試劑盒
adipsin; Adipsin/complement factor D; adn; C3 convertase activator; CFAD_HUMAN; CFD; Complement factor D; complement factor D preproprotein; D component of complement; DF; FactorD; PFD; Properdin factor D.
大鼠腮腺細(xì)胞
小鼠胰腺腺泡上皮細(xì)胞
EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞
B16-F1 小鼠黑色素瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。