培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠神經(jīng)干細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腦組織
生長特性
懸浮
細胞形態(tài)
球形
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1710
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶，Accutase
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
大鼠神經(jīng)干細胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)干細胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞的能力，能自我更新，并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經(jīng)干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細胞。需要強調(diào)的是，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中，不同的神經(jīng)干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同，分布也不同。神經(jīng)干細胞作為干細胞的一種，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生，對損傷和具有反應能力。神經(jīng)干細胞在、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向神經(jīng)細胞、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提。神經(jīng)干細胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細胞懸液，將部分細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中，2×105個細胞/瓶，每7-10d傳代1次，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次，培養(yǎng)條件不變。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)干細胞采用胰蛋白酶消化后差速貼壁，結合神經(jīng)干細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)干細胞經(jīng)Nestin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Mouseencephalomyelitisvirus(EV)antibody(IgG)ELISAkit
大鼠α干擾素(IFN-α)elisa分析檢測試劑盒
IFN-α ELISA Kit
人含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域激酶2(Tie-2)elisa分析檢測試劑盒
HumanTie-2ELISAKit
蛋白示蹤上樣緩沖液非還原，5× 5ml
PARP蛋白表達西方雜交分析試劑盒
小鼠CD33分子(CD33)elisa檢測試劑盒
桌面DNA溶液
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析檢測試劑盒
IL-8 ELISA Kit
人白細胞活化黏附因子(ALCAM)elisa分析檢測試劑盒
HumanALCAMELISAKit
細胞半胱-9（CASPASE-9）活性比色法定量檢測試劑盒
人補體蛋白4(C4)elisa分析檢測試劑盒
大鼠促性腺抑制(GnIH)elisa檢測試劑盒
小鼠載脂蛋白C4(APOC4)elisa檢測試劑盒
核受體蛋白NR2E3抗體
NR2E3
9號染色體開放閱讀框25抗體
C9orf25
腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體 Anti-TRAF6
Cyclin A1相互作用蛋白抗體 Anti-PROCA1
磷酸化蛋白磷酸酶2C亞型α抗體 Anti-phospho-PPM1A(Ser375)
染色質(zhì)組裝因子1P155抗體 Anti-p150 CAF1
羅丹明標記的小鼠抗兔IgG H&L
大鼠神經(jīng)干細胞Mouse Anti-Rabbit IgG H&L / RBITC
唾液酸轉(zhuǎn)移酶4A抗體
FLJ22318; MGC112682; Protein RMD5 homolog B; Required for meiotic nuclear division 5 homolog B (S. cerevisiae) ; RP23-79E13.4; RMD5B_HUMAN.
大鼠腎動脈內(nèi)皮細胞
小鼠眼外肌成纖維細胞
FADu 人咽鱗癌細胞
B16小鼠黑色素瘤細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。