產(chǎn)品名稱
大鼠食管成纖維細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
食管
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1556
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠食管成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介：
大鼠食管成纖維細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變?yōu)閺蛯?，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。食管的外膜，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，富有血管、管及神經(jīng)。主要包含食管成纖維細胞，成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠食管成纖維細胞采用胰蛋白酶 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠食管成纖維細胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
GP-BBELISAKit
大鼠催產(chǎn)素(OT)elisa分析檢測試劑盒
OT ELISA Kit
人結(jié)蛋白(DES)抗體elisa分析檢測試劑盒
Humananti-desmin(DES)antibodyELISAkit
人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)elisa分析檢測試劑盒
PH5-6顯色（CHLOROPHENOL RED）指示溶液
小鼠脂蛋白脂酶(LIPD)elisa檢測試劑盒
大鼠內(nèi)皮素2(EDN2)elisa檢測試劑盒
環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa分析檢測試劑盒
cAMP ELISA Kit
人單胺氧化酶(MAO)elisa分析檢測試劑盒
MAOELISAKit
大鼠環(huán)磷腺苷(cAMP)elisa檢測試劑盒
中性轉(zhuǎn)化酶（NI）測試盒
人核因子κB抑制物激酶α(IKK-α)elisa分析檢測試劑盒
體外非細胞系統(tǒng)細胞色素P450亞酶4A1（LAURIC ACID）活性
NAALADL2蛋白抗體
NAALADL2
肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶FKBP11抗體
FKBP11
端粒酶調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白抗體 Anti-TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase
P21蛋白激活的蛋白激酶6抗體 Anti-PAK6
磷酸化Nemo樣激酶抗體 Anti-Phospho-Nemo-like kinase (Thr298)
視黃酸激活基因8抗體 Anti-Stra8
PE-Cy3標記的兔抗牛IgG H&L
大鼠食管成纖維細胞Rabbit Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy3
EXPH5蛋白抗體
GalNAc-T13; GalNAc T13; GalNAc transferase 13; N acetylgalactosaminyltransferase 13; Polypeptide GalNAc transferase 13; pp GaNTase 13; Protein UDP acetylgalactosaminyltransferase 13; UDP GalNAc:polypeptide N acetylgalactosaminyltransferase 13; UDP N acetyl alpha D galactosamine:polypeptide; GLT13_HUMAN.
大鼠食管平滑肌細胞
小鼠嗅球神經(jīng)干細胞
HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞
Bel-7402人肝癌細胞